Anticorpo monoclonale di topo anti-Lamin A/C validato KO per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P02545

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della Lamin A/C

• La Lamin A e la Lamin C, i principali prodotti proteici del gene LMNA, formano la rete della lamina nucleare situata al di sotto della membrana nucleare interna, collegando l'involucro nucleare e la cromatina per regolare l'assemblaggio nucleare, l'organizzazione della cromatina e la dinamica dei telomeri. Riferimenti correlati: PMID:10080180 PMID:10580070 PMID:10587585
• La Lamin A/C regola le proprietà meccaniche del nucleo e la rigidità della matrice, influenzando così la meccanotrasduzione cellulare. Riferimenti correlati: PMID:23990565 PMID:25127216
• La lamina nucleare va incontro a disassemblaggio dipendente dal ciclo cellulare in profase e a riassemblaggio in telofase. Riferimenti correlati: PMID:2188730 PMID:2344612
• La Lamin A/C svolge un ruolo nella riparazione del DNA stabilizzando le rotture a doppio filamento del DNA e prevenendo le traslocazioni cromosomiche. Riferimenti correlati: PMID:31548606
• È necessaria per lo sviluppo e il mantenimento del sistema nervoso periferico, dei muscoli scheletrici, delle ossa e del cuore, e previene l'infiltrazione di grasso nei muscoli e nel midollo osseo. Riferimenti correlati: PMID:10080180 PMID:10814726 PMID:11799477 PMID:12075506 PMID:15317753 PMID:18611980 PMID:10587585 PMID:10580070 PMID:12927431
• L'accumulo di Prelamin-A/C nelle cellule muscolari lisce vascolari promuove la senescenza interrompendo la mitosi e causando danni al DNA. Riferimenti correlati: PMID:20458013
• La Lamin A/C si localizza principalmente nella lamina nucleare, nel nucleoplasma e nell'involucro nucleare; il suo accumulo nelle cellule muscolari lisce vascolari aumenta con l'età e la malattia, correlando con la senescenza cellulare e lo stress ossidativo.
• Le mutazioni di LMNA causano uno spettro di laminopatie, tra cui la distrofia muscolare di Emery-Dreifuss, la cardiomiopatia dilatativa, la distrofia muscolare dei cingoli e la sindrome di progeria di Hutchinson-Gilford, spesso associate a un'elaborazione post-traduzionale aberrante.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Si consiglia di utilizzare lisati arricchiti in frazioni nucleari per il WB, al fine di migliorare la rilevazione della Lamin A/C; l'anticorpo riconosce una banda di circa 74 kDa.
• Utilizzare linee cellulari knockout per LMNA come controlli negativi per confermare la specificità dell'anticorpo.
• Per l'immunofluorescenza, permeabilizzare le cellule con Triton X-100 allo 0,1% per visualizzare la lamina nucleare e prevedere una colorazione ad anello.
• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 403–572, una regione comune sia alla Lamin A sia alla Lamin C; pertanto, è probabile che l'anticorpo rilevi entrambe le isoforme. Verificare nel proprio contesto sperimentale.
• Eseguire un pre-test su tessuti e cellule di topo e ratto per convalidare la reattività crociata prima di esperimenti su larga scala.
• Per IHC-P, ottimizzare il recupero antigenico (ad es. con tampone citrato) e includere controlli tissutali positivi appropriati (muscolo scheletrico, pelle).
• Per le applicazioni ELISA, titolare l'anticorpo e ottimizzare le condizioni di rivestimento e rilevazione.

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