[Convalidato KO] Anticorpo policlonale di coniglio Anti-Lamin A/C per WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P02545

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di Lamin A/C

• Le lamine sono proteine a filamento intermedio che formano la lamina nucleare, una rete fibrosa situata sotto la membrana nucleare interna, che fornisce supporto strutturale e organizza la cromatina. Lamin A e Lamin C, entrambe codificate dal gene LMNA tramite splicing alternativo, sono componenti principali di questa struttura e sono presenti in quantità approssimativamente uguali. Riferimenti correlati: PMID:10080180 PMID:10580070 PMID:10587585

• La lamina nucleare agisce come impalcatura per l'involucro nucleare, ancorando la cromatina e i complessi dei pori nucleari e svolgendo un ruolo nella replicazione del DNA, nella trascrizione e nell'assemblaggio nucleare. Lamin A/C contribuisce anche alla rigidità meccanica del nucleo e alla meccano-risposta cellulare. Riferimenti correlati: PMID:23990565 PMID:25127216

• La fosforilazione dipendente dal ciclo cellulare regola lo smontaggio della lamina durante la mitosi e il rimontaggio nella telofase, garantendo una corretta dinamica dell'involucro nucleare. Riferimenti correlati: PMID:2188730 PMID:2344612

• Lamin A/C partecipa alla riparazione delle rotture doppie del DNA stabilizzando le estremità del DNA rotto e prevenendo la traslocazione cromosomica, interagendo con fattori di riparazione come XRCC4. Riferimenti correlati: PMID:31548606

• Lamin A/C è essenziale per lo sviluppo del sistema nervoso periferico e del muscolo scheletrico, la proliferazione delle cellule satellite muscolari, l'osteoblastogenesi e la formazione ossea. Previene inoltre l'infiltrazione adiposa del muscolo e del midollo osseo, mantenendo volume e forza dei tessuti. Riferimenti correlati: PMID:10080180 PMID:10814726 PMID:11799477 PMID:12075506 PMID:15317753 PMID:18611980 PMID:10587585

• Nel sistema cardiovascolare, l'accumulo di prelamina A/C nelle cellule muscolari lisce vascolari (VSMC) accelera la senescenza, altera la mitosi e induce danni al DNA, contribuendo alla patologia vascolare correlata all'età. Lamin A/C è anche necessaria per l'omeostasi cardiaca. Riferimenti correlati: PMID:20458013 PMID:10580070 PMID:12927431 PMID:18611980

• Subcellularmente, Lamin A/C è localizzata principalmente nella lamina nucleare, ma si trova anche nel nucleoplasma, nella matrice nucleare e nelle speckle nucleari, riflettendo i suoi ruoli dinamici. Nelle arterie, la prelamina A/C si accumula con l'età e la malattia, in particolare nelle lesioni aterosclerotiche, colocalizzando con le VSMC senescenti. L'espressione aumenta a causa della downregolazione di ZMPSTE24 mediata dallo stress ossidativo.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (aa 403–572 della Lamin A/C umana) bersaglia una regione C-terminale conservata tra Lamin A e Lamin C, rendendo questo anticorpo policlonale adatto per rilevare entrambe le isoforme in campioni umani, di topo e ratto. La convalida KO verifica la specificità.
• Per il Western blotting, il peso molecolare atteso è ~74 kDa per Lamin A; Lamin C può comparire intorno a ~65 kDa. Si consiglia di caricare una quantità adeguata di proteina e di utilizzare condizioni di lisi appropriate, poiché la solubilità delle lamine può essere influenzata dalla forza ionica e dal detergente.
• Nell'immunofluorescenza e nell'IHC, Lamin A/C colora principalmente la periferia nucleare (lamina). Le condizioni di permeabilizzazione e fissazione devono essere ottimizzate per il tipo di cellula o tessuto bersaglio.
• Per l'IP, l'anticorpo può catturare i complessi di Lamin A/C; eseguire controlli appropriati.
• Poiché Lamin A/C subisce diverse modificazioni post-traduzionali (ad esempio fosforilazione, acetilazione), il trattamento con inibitori o l'induzione dell'arresto del ciclo cellulare possono alterare la rilevazione.

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