[Convalidato KO] Anticorpo monoclonale di coniglio anti-LAMP2 per WB, IHC-P, ELISA - P13473

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di LAMP2

• LAMP2 (Glicoproteina 2 associata alla membrana lisosomiale), anche indicata come CD107b e LGP-96, è una proteina di membrana lisosomiale altamente glicosilata. Tre isoforme principali (LAMP-2A, LAMP-2B, LAMP-2C) sono prodotte per splicing alternativo, ciascuna con ruoli regolatori ed espressione tessuto-specifica distinti.
• Funzione principale: LAMP2 è essenziale per la biogenesi dei lisosomi, la regolazione del pH lisosomiale (tramite inibizione diretta di TMEM175) e l'autofagia, in particolare l'autofagia mediata da chaperone (CMA). Lega proteine bersaglio degli chaperon (es. GAPDH, GPX4, NLRP3) e le indirizza alla degradazione lisosomiale. (PubMed:11082038, PubMed:18644871, PubMed:24880125, PubMed:37390818, PubMed:36586411) Riferimenti correlati: PMID:11082038, PMID:18644871, PMID:24880125, PMID:37390818, PMID:36586411
• Facilita la fusione autofagosoma-lisosoma promuovendo l'accumulo di STX17 sugli autofagosomi, un processo necessario per la degradazione autofagica. (PubMed:27628032) Riferimenti correlati: PMID:27628032
• Svolge un ruolo critico nella presentazione mediata da MHC di classe II di antigeni esogeni, ma non di quelli endogeni, supportando la degradazione proteica lisosomiale. (PubMed:15894275, PubMed:20518820) Riferimenti correlati: PMID:15894275, PMID:20518820
• Infezione microbica: Interagisce sia con FURIN che con la forma non processata della proteina di fusione F del virus della parotite, facilitando la scissione mediata da FURIN della proteina virale.
• Localizzazione subcellulare: Risiede prevalentemente nelle membrane di lisosomi, endosomi tardivi e autofagosomi; si sposta anche sulla membrana cellulare.
• Specificità tissutale: L'isoforma LAMP-2A è altamente espressa in placenta, polmone e fegato, mentre LAMP-2B è ampiamente distribuita e LAMP-2C è prominente in cuore, cervello e muscolo scheletrico. (PubMed:26856698, PubMed:7488019) Riferimenti correlati: PMID:26856698, PMID:7488019
• Caratteristiche strutturali chiave includono ponti disolfuro, pesante glicosilazione N-linked, un'elica transmembrana singola e una breve coda citoplasmatica. Varianti genetiche sono collegate alla glicogenosi (malattia di Danon).

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il Western blot (WB), il peso molecolare previsto è 45 kDa, ma a causa dell'estesa glicosilazione, LAMP2 tipicamente migra a circa 100–120 kDa. Convalidare l'identità della banda utilizzando controlli knockout o di silenziamento.
• Quando si esegue l'immunoistochimica (IHC-P), considerare il recupero dell'antigene indotto dal calore (es. tampone citrato, pH 6.0) per esporre l'epitopo e ottimizzare la colorazione.
• Per l'ELISA, titolare l'anticorpo e utilizzare una coppia abbinata o una rilevazione diretta per determinare le concentrazioni di lavoro ottimali; verificare la specificità con proteina LAMP2 ricombinante.
• Questo anticorpo è stato convalidato utilizzando un peptide sintetico dal dominio luminale (aa 311-410); riconosce LAMP2 umano, murino e di ratto, rendendolo adatto per studi cross-specie.

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