[Validato KO] Anticorpo Monoclonale Anti-LAMP2 Coniglio per WB, IHC-P, IF/ICC, FC, ELISA - P13473

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di LAMP2

• LAMP2 (Glicoproteina 2 associata alla membrana lisosomiale) è una glicoproteina transmembrana di tipo I altamente glicosilata, nota anche come CD107b o LGP-96. Tre isoforme principali (LAMP-2A, -2B e -2C) sono prodotte da splicing alternativo, ciascuna con distribuzione tissutale e ruoli distinti nella funzione lisosomiale.
• Svolge un ruolo essenziale nella biogenesi dei lisosomi, nella regolazione del pH lisosomiale e nell'autofagia. LAMP2 inibisce direttamente il canale protonico TMEM175, facilitando l'acidificazione lisosomiale necessaria per l'attività ottimale delle idrolasi. Riferimenti correlati: PMID:11082038, PMID:18644871, PMID:24880125, PMID:37390818
• LAMP2 è un recettore centrale nell'autofagia mediata da chaperone (CMA). Lega proteine substrato (es. GAPDH, GPX4, NLRP3) riconosciute dalla chaperonina HSC70 e le indirizza alla degradazione lisosomiale, specialmente in condizioni di digiuno. Riferimenti correlati: PMID:11082038, PMID:18644871, PMID:24880125, PMID:36586411
• Durante la macroautofagia, LAMP2 è necessaria per la fusione degli autofagosomi con i lisosomi; le cellule prive di LAMP2 non riescono a reclutare STX17 sugli autofagosomi, impedendo la degradazione del carico autofagico. Riferimenti correlati: PMID:27628032
• LAMP2 contribuisce all'immunità adattativa facilitando la presentazione mediata da MHC di classe II di antigeni esogeni; promuove la generazione di peptidi antigenici all'interno del compartimento endosomiale/lisosomiale. Riferimenti correlati: PMID:15894275, PMID:20518820
• Durante l'infezione da virus della parotite, LAMP2 supporta la scissione mediata da FURIN della proteina di fusione virale F interagendo sia con FURIN che con la proteina virale non processata.
• LAMP2 si localizza principalmente sulla membrana lisosomiale e, in misura minore, sugli endosomi, autofagosomi e membrana plasmatica.
• Espressione tissutale isoforma‑specifica: LAMP-2A è abbondante in placenta, polmone e fegato; LAMP-2B è ampiamente espresso in tessuti come milza, timo, prostata e testicolo; LAMP-2C si trova in intestino tenue, colon, cuore, cervello e muscolo scheletrico. Riferimenti correlati: PMID:26856698, PMID:7488019

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio luminale (amminoacidi 29–375) della LAMP2 umana, bersagliando un epitopo extracellulare accessibile in campioni non permeabilizzati per la colorazione di superficie (es. FC) e in campioni permeabilizzati per il rilevamento totale.
• Per il Western blot, il peso proteico del core previsto è di 45 kDa, ma l'estesa glicosilazione N‑ e O‑legata tipicamente risulta in una banda ampia che migra a ~90–110 kDa; utilizzare un controllo positivo adatto come lisato cellulare totale di HeLa o HepG2.
• Nell'immunofluorescenza e IHC, le condizioni di fissazione/permeabilizzazione devono essere ottimizzate per accedere al compartimento della membrana lisosomiale; considerare la co‑colorazione con marcatori lisosomiali (es. LAMP1) per confermare la localizzazione.
• Per la citometria a flusso, la colorazione intracellulare (FC intra) richiede la permeabilizzazione cellulare; la compatibilità con anticorpi secondari coniugati a fluorofori e i protocolli di fissazione dovrebbero essere validati nel vostro specifico contesto cellulare.
• Questo anticorpo è stato validato per la conferma del knockout; includere sempre controlli appropriati di knockout o knockdown per verificare la specificità dell'anticorpo nel vostro saggio.

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