[Convalidato KO] Anticorpo monoclonale di coniglio anti-LDHA per WB, IF/ICC, ELISA - P00338

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di LDHA

• LDHA (catena A della L-lattato deidrogenasi) è un enzima glicolitico chiave che catalizza l'interconversione stereospecifica di piruvato e lattato, accoppiata al turnover di NADH/NAD+.
• Nota anche come subunità muscolare di LDH (LDH-M), è espressa prevalentemente in tessuti anaerobici come muscolo scheletrico e fegato, dove è richiesto un elevato flusso glicolitico.
• Si localizza nel citoplasma, in linea con il suo ruolo nel metabolismo citosolico.
• Subisce multiple modificazioni post-traduzionali tra cui acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione, che possono regolarne l'attività, la stabilità o le interazioni con partner.
• Lo splicing alternativo produce diverse isoforme, sebbene le loro differenze funzionali non siano ancora completamente caratterizzate.
• Mutazioni in LDHA sono associate alla malattia da accumulo di glicogeno di tipo XI (GSD11), sottolineando il suo ruolo critico nel metabolismo energetico.
• La proteina ha un peso molecolare di circa 36.7 kDa (UniProt: 36689 Da), ma l'anticorpo rileva una banda tra 26-39 kDa probabilmente a causa di variazioni isoformiche o PTM.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'anticorpo è stato generato contro un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 200-300 di LDHA umano. Questa regione è conservata tra uomo, topo e ratto, spiegando l'ampia reattività incrociata.
• Le applicazioni consigliate includono Western blot (WB), immunofluorescenza/ICC (IF/ICC) ed ELISA. Per il WB, la banda rilevata può apparire tra 26–39 kDa; considerando il MW previsto di ~36.7 kDa, convalidare la specificità della banda nel proprio sistema campione.
• Si consiglia di utilizzare lisati tissutali o cellulari appropriati che esprimono LDHA, come muscolo scheletrico o fegato, come controlli positivi.
• Per l'immunofluorescenza, è necessaria la permeabilizzazione poiché LDHA è citoplasmatica. Convalidare il pattern di colorazione in linee cellulari rilevanti.

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