[KO Convalidato] Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-MAPKAPK3 per WB, IF/ICC, ELISA - Q16644

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di MAPKAPK3

• La proteina chinasi 3 attivata da MAP chinasi (MAPKAPK3), nota anche come chinasi del cromosoma 3p (3pK), è una serina/treonina-proteina chinasi attivata dallo stress codificata dal gene MAPKAPK3 nell'uomo.
• Svolge un ruolo chiave nella produzione di citochine, nell'endocitosi, nella migrazione cellulare, nel rimodellamento della cromatina e nella regolazione trascrizionale. In risposta allo stress, viene fosforilata e attivata da p38-alfa/MAPK14, portando alla fosforilazione del substrato.
• MAPKAPK3 condivide ridondanza funzionale con MAPKAPK2, mostrando la stessa specificità di substrato, ma la sua attività chinasica e i livelli di espressione sono inferiori. Entrambe fosforilano substrati come HSP27/HSPB1, KRT18, KRT20, RCSD1, RPS6KA3, TAB3 e TTP/ZFP36.
• La proteina si localizza sia nel nucleo che nel citoplasma, consentendo il suo coinvolgimento in diversi processi di segnalazione.
• Ampiamente espressa nei tessuti, con livelli più alti nel cuore e nel muscolo scheletrico; assente nel cervello. È espressa anche nell'epitelio pigmentato retinico. Riferimenti correlati: PMID:26744326
• Coinvolta nelle risposte infiammatorie regolando la produzione di TNF e IL6 post-trascrizionalmente attraverso la fosforilazione di proteine leganti elementi ricchi di AU come TTP/ZFP36, modulando la stabilità e la traduzione dell'mRNA.
• Necessaria per la macropinocitosi acuta indotta da TLR nelle cellule dendritiche tramite fosforilazione e attivazione di RPS6KA3, e agisce anche come modulatore della repressione mediata da Polycomb.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione e acetilazione; la proteina contiene un dominio chinasico legante ATP ed è classificata come transferasi.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1-240) di MAPKAPK3 umano, il che può contribuire al riconoscimento della proteina a lunghezza intera (~43 kDa) nel Western blot. Considerare di includere controlli positivi e negativi appropriati nel proprio esperimento.
• Il peso molecolare previsto è di 43 kDa; in WB, ci si aspetta una banda vicina a questa dimensione. Convalidare nel proprio sistema di campioni specifico poiché modifiche post-traduzionali o isoforme possono causare lievi spostamenti.
• Per IF/ICC, notare che MAPKAPK3 si localizza sia nel nucleo che nel citoplasma; ottimizzare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione per preservare l'antigenicità. Si raccomanda una colorazione di contrasto nucleare.
• In ELISA, l'immunogeno ricombinante (aa 1-240) può servire come controllo positivo; tuttavia, l'idoneità dell'anticorpo per ELISA sandwich dovrebbe essere convalidata con anticorpi accoppiati.
• La reattività incrociata è prevista per umano, topo e ratto in base all'omologia di sequenza; verificare le prestazioni se utilizzato in altre specie.

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