Anticorpo monoclonale Anti-MLH1 convalidato KO per WB, IHC-P, ELISA - P40692

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di MLH1

• La proteina di riparazione dei mismatch del DNA Mlh1 (omologo 1 della proteina MutL) è la subunità catalitica del sistema di riparazione dei mismatch del DNA post-replicativo (MMR), formando l'eterodimero MutL alfa con PMS2 e l'eterodimero MutL gamma con MLH3.
• MutL alfa viene reclutato sul DNA con mismatch dai complessi MutS alfa (MSH2-MSH6) o MutS beta (MSH2-MSH3); attiva quindi l'endonucleasi PMS2 per introdurre rotture del filamento, avviando la rimozione e la riparazione del mismatch.
• MLH1 localizza prevalentemente nel nucleo ed è associato ai cromosomi durante i processi di replicazione e riparazione del DNA.
• Espresso in più tessuti tra cui colon, linfociti, mammella, polmone, milza, testicolo, prostata, tiroide, cistifellea e cuore.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione, fosforilazione e coniugazione con ubiquitina, che possono regolarne la stabilità e la funzione.
• MLH1 è classificato come oncosoppressore; le mutazioni germinali sono legate al cancro del colon-retto ereditario non poliposico (HNPCC), noto anche come sindrome di Lynch.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che comprende gli amminoacidi 350–450 dell'MLH1 umano; la specificità dell'epitopo deve essere verificata per le applicazioni previste.
• Per Western blot, l'anticorpo rileva una banda a circa 85 kDa; convalidare utilizzando lisati cellulari umani o di topo con espressione nota di MLH1 e includere controlli knockout se disponibili.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), ottimizzare le condizioni di recupero dell'antigene e la titolazione; confrontare i modelli di colorazione con la distribuzione tissutale nota e utilizzare sezioni di tessuto knockout come controlli negativi.
• Per ELISA, abbinare questo anticorpo a un reagente di rilevamento adatto e convalidare utilizzando la proteina ricombinante MLH1 per stabilire sensibilità e specificità.

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