[KO Validato] Anticorpo policlonale di coniglio anti-NSDHL per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q15738

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di NSDHL

• NSDHL (sterolo-4-alfa-carbossilato 3-deidrogenasi, decarbossilante), denominata anche H105E3, XAP104, SDR31E1 o HL, è un enzima codificato dal gene NSDHL nell'uomo.
• Catalizza la decarbossilazione ossidativa, dipendente da NAD(P)(+), dei gruppi metilici C4 degli 4-alfa-carbossisteroli, una fase critica della biosintesi del colesterolo post-squalenica (per similarità).
• NSDHL contribuisce inoltre alla regolazione del traffico endocitico del recettore del fattore di crescita epidermico (EGFR) (per similarità).
• La proteina appartiene alla famiglia delle 3-beta-idrossisteroide deidrogenasi/isomerasi e possiede domini di deidrogenasi/riduttasi a catena corta (SDR); è classificata come ossidoreduttasi che utilizza NAD come cofattore.
• A livello subcellulare, NSDHL si localizza nella membrana del reticolo endoplasmatico e nelle goccioline lipidiche, in accordo con il suo ruolo centrale nel metabolismo degli steroli.
• Presenta un'ampia espressione tissutale, rilevata nel cervello, nel cuore, nel fegato, nei polmoni, nei reni, nella pelle e nella placenta.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione, che possono modulare l'attività enzimatica o le interazioni.
• Le mutazioni di NSDHL sono associate alla sindrome CHILD (emidisplasia congenita con eritroderma ittiosiforme e difetti degli arti) e alla disabilità intellettiva legata al cromosoma X, sottolineandone l'importanza nei disturbi dello sviluppo correlati ai lipidi.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 1–240 di NSDHL umano, una regione contenente domini catalitici conservati; questo design può garantire un ampio riconoscimento tra le specie, ma è sempre necessario confermare l'omologia di sequenza quando si lavora con organismi non elencati.
• Per il Western blot, si consiglia di utilizzare un controllo positivo come il lisato di cellule HeLa, HepG2 o di tessuto epatico murino; il peso molecolare previsto è di circa 42 kDa, sebbene le modifiche post-traduzionali possano causare lievi variazioni.
• Nell'immunoistochimica (sezioni in paraffina) e nell'immunofluorescenza, validare l'anticorpo in tessuti noti per esprimere NSDHL (ad es. pelle e placenta) e ottimizzare le condizioni di recupero antigenico.
• A causa della natura policlonale, il fondo può variare tra i diversi lotti; si raccomanda l'inclusione di controlli negativi appropriati (lisati KO o peptidi bloccanti) per valutare la specificità.
• Per le applicazioni ELISA, l'abbinamento di questo anticorpo con un anticorpo di cattura diretto contro un epitopo distinto di NSDHL può aumentare la sensibilità del test; si consiglia una titolazione preliminare.

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