[Convalidato KO] Anticorpo policlonale anti-Nucleobindin-1 per WB, IF/ICC, ELISA - Q02818

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Nucleobindina-1

• La Nucleobindina-1 (NUCB1), nota anche come CALNUC, è una principale proteina legante il calcio localizzata prevalentemente all'apparato di Golgi, dove potrebbe regolare l'omeostasi del calcio (Per similarità).
• Agisce come un fattore di scambio di nucleotidi guaninici non recettoriale (GEF), legando e attivando le subunità alfa delle proteine G, collegando così la segnalazione del calcio alle vie mediate dalle proteine G (Per similarità).
• La localizzazione subcellulare comprende la membrana della rete cis-Golgi, il citoplasma e la secrezione, indicando ruoli dinamici nel traffico intracellulare e nella segnalazione extracellulare.
• NUCB1 contiene domini di legame del calcio a mano EF, una regione a elica superavvolta (a ricciolo) e subisce glicosilazione e fosforilazione, che modulano la sua funzione e stabilità.
• L'espressione tissutale è ampia, includendo cuore fetale e adulto, polmone, fegato, rene, cervello e muscolo scheletrico adulto, placenta e pancreas, sottolineando la sua importanza biologica ubiquitaria.
• L'ulteriore attività di legame al DNA in vitro e la caratterizzazione strutturale (struttura 3D disponibile) evidenziano la sua natura multifunzionale.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli aa 302–461 di NUCB1 umano; considerare l'utilizzo di un frammento ricombinante o della proteina a lunghezza intera come controllo positivo negli saggi.
• Per il Western blot, è prevista una banda predominante a ~54 kDa; possono essere osservate bande minori dovute a modificazioni post-traduzionali o isoforme, e la specificità dell'anticorpo può essere confermata con lisati di cellule KO.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, una permeabilizzazione delicata e controcolorazioni specifiche per il Golgi (es. GM130) aiutano a confermare la localizzazione; evitare detergenti aggressivi che disturbano le membrane del Golgi.
• Per le applicazioni ELISA, titolare l'anticorpo e utilizzare un blocco appropriato per minimizzare il fondo; l'abbinamento con un anticorpo di cattura può aumentare la sensibilità.

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