[Convalidato KO] Anticorpo policlonale di coniglio anti-PAK2 per WB, IF/ICC, ELISA - Q13177

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PAK2

• PAK2 è una serina/treonina protein chinasi coinvolta nella regolazione del citoscheletro, motilità cellulare, progressione del ciclo cellulare, apoptosi e proliferazione. Riferimenti correlati: PMID:12853446, PMID:16617111, PMID:19273597
• Agisce come effettore a valle delle piccole GTPasi CDC42 e RAC1; il legame delle GTPasi attive triggera un cambiamento conformazionale e l'autofosforilazione. Riferimenti correlati: PMID:7744004
• La PAK2 full-length promuove la sopravvivenza e la crescita cellulare, mentre il taglio mediato dalla caspasi produce il frammento pro-apoptotico p34 che si trasloca nel nucleo e attiva la via JNK. Riferimenti correlati: PMID:7744004, PMID:12853446, PMID:16617111, PMID:9171063
• PAK2 fosforila diversi substrati tra cui MAPK4/6, JUN, istone H4 (che facilita l'assemblaggio dei nucleosomi), BAD, proteina ribosomiale S6 e CASP7. Riferimenti correlati: PMID:21317288, PMID:21177766, PMID:21724829, PMID:21555521, PMID:27889207
• Al di là della sua attività catalitica, PAK2 lega ARHGEF7 e GIT1 per regolare l'orientamento del fuso mitotico durante la mitosi. Riferimenti correlati: PMID:19273597, PMID:19923322
• La proteina si localizza nel citoplasma, nel nucleo, nella regione perinucleare e sulle membrane.
• È espressa ubiquitariamente, con livelli più elevati osservati nel muscolo scheletrico, ovaio, timo e milza.
• PAK2 subisce acetilazione, miristoilazione e ubiquitinazione; è un enzima allosterico con attività di legame all'ATP ed è anche noto come p58, PAK65, gamma-PAK e PAK-2.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Per il Western blotting (WB), il peso molecolare previsto della PAK2 full-length è di ~58 kDa; in condizioni di apoptosi, può essere osservato il frammento tagliato di ~34 kDa. Si consiglia di includere controlli appropriati.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), PAK2 mostra colorazione citoplasmatica e nucleare, con possibile arricchimento nelle regioni perinucleari e sulle membrane.
• Per l'ELISA, l'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1–212); l'abbinamento con anticorpi diretti contro altri epitopi può consentire lo sviluppo di ELISA sandwich.
• Trattandosi di un anticorpo policlonale, è necessario verificare la coerenza tra lotti; si consiglia di utilizzare linee cellulari knockout per PAK2 come controllo negativo per confermare la specificità nei vostri saggi.
• È raccomandato il blocco standard e l'ottimizzazione della diluizione (ad esempio, partendo da 1:500 per il WB); è essenziale eseguire test empirici nel sistema di campione pertinente.

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