Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-PHD2/EGLN1 Convalidato KO per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9GZT9

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di PHD2/EGLN1

• Egl nine homolog 1 (EGLN1), comunemente noto come PHD2, è una prolil idrossilasi del fattore indotto dall'ipossia (HIF) ed è il principale sensore di ossigeno in condizioni normossiche.
• PHD2 catalizza l'idrossilazione di specifici residui di prolina all'interno dei domini di degradazione dipendenti dall'ossigeno di HIF1A e HIF2A, portando all'ubiquitinazione mediata da VHL e alla degradazione proteasomiale.
• Sotto ipossia, l'attività di PHD2 è ridotta, consentendo la stabilizzazione di HIFα, la traslocazione nucleare e l'attivazione trascrizionale di geni coinvolti nell'angiogenesi, nell'eritropoiesi e nell'adattamento metabolico.
• L'enzima appartiene alla famiglia delle diossigenasi EGLN e contiene un motivo zinc-finger; richiede ferro, 2-ossoglutarato e ascorbato come cofattori per la sua funzione catalitica.
• Multiple isoforme sono prodotte da splicing alternativo, e sono stati riportati modificazioni post-traduzionali come acetilazione, fosforilazione e S-nitrosilazione.
• A livello subcellulare, PHD2 si localizza prevalentemente nel citoplasma ma può essere rilevato anche nel nucleo.
• PHD2 è ampiamente espresso, con i livelli più alti nel muscolo scheletrico, cuore, cervello e rene; si trova anche nei miociti cardiaci, nelle cellule endoteliali aortiche e nella muscolatura liscia delle arterie coronariche.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente alla regione N-terminale (aa 1-100) di PHD2 umano; considerare l'uso di un peptide bloccante per i controlli di specificità.
• Per il Western blotting, un intervallo di diluizione iniziale tipico è 1:500–1:2000; convalidare la diluizione ottimale nel proprio sistema campione e notare una banda attesa a ~46 kDa.
• Per IHC-P, potrebbe essere necessario il recupero dell'antigene; testare protocolli a base di citrato o EDTA e includere controlli positivi appropriati (ad es. tessuto cardiaco o muscolo scheletrico).
• Per IF/ICC, le condizioni di fissazione e permeabilizzazione dovrebbero essere ottimizzate; PHD2 viene rilevato nel citoplasma e nel nucleo.
• L'anticorpo è stato convalidato in campioni KO; includere sempre controlli knockout o knockdown quando si indaga la specificità del target.

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