[KO Validato] Anticorpo Policlonale Anti-PKA RIIα (PRKAR2A) - P13861

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di PKA RIIα (PRKAR2A)

• PRKAR2A codifica per la subunità regolatoria di tipo II-alfa della proteina chinasi cAMP-dipendente (PKA), una delle quattro isoforme regolatorie che modulano l'attività della PKA.
• Legandosi al cAMP, la subunità regolatoria si dissocia dalle subunità catalitiche, rilasciandole per fosforilare i bersagli a valle nella cascata di segnalazione del cAMP.
• Le catene regolatorie di tipo II ancorano la PKA a siti subcellulari specifici interagendo con proteine di ancoraggio della chinasi A (AKAP), come la chinasi MAP2, facilitando una segnalazione localizzata.
• L'espressione di PRKAR2A varia tra i tessuti; i quattro tipi di subunità regolatorie mostrano distribuzioni tissutali distinte e possono essere regolati in modo costitutivo o inducibile.
• La proteina si localizza nel citoplasma e nella membrana cellulare, in linea con la sua funzione nella segnalazione cAMP compartimentalizzata.
• Il gene PRKAR2A subisce splicing alternativo e la proteina è soggetta ad acetilazione e fosforilazione, con un peso molecolare calcolato di circa 45.5 kDa (UniProt).

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è una proteina ricombinante che copre gli amminoacidi 1-404 di PRKAR2A umana, progettata per generare anticorpi contro più epitopi; ciò può aumentare la sensibilità tra applicazioni e specie.
• Per il Western blot, un range di diluizione iniziale di 1:500–1:2000 è spesso adatto; confermare la specificità utilizzando lisati knockout (KO), poiché questo anticorpo è stato validato KO.
• Data la reattività con topo e ratto, l'anticorpo può essere considerato per studi interspecie; tuttavia, convalidare i livelli di espressione nel proprio sistema modello.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), ottimizzare i protocolli di fissazione e permeabilizzazione, poiché la proteina si localizza sia nel citoplasma che nella membrana.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di rilevamento; si consiglia di accoppiarlo con un anticorpo di cattura adeguato e di procedere con l'ottimizzazione standard del saggio.

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