Anticorpo policlonale convalidato KO Anti-PRMT4/CARM1 per WB, IHC-P, ELISA - Q86X55

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di PRMT4/CARM1

• PRMT4/CARM1 è una istone-arginina metiltransferasi che catalizza la mono- e la dimetilazione asimmetrica dei residui di arginina in proteine chiave coinvolte nell'impacchettamento del DNA, nella regolazione della trascrizione, nello splicing del pre-mRNA e nella stabilità dell'mRNA.
• Reclutato sui promotori genici con le istone acetiltransferasi (es. EP300, famiglia p160), CARM1 metila l'istone H3 all'arginina 17 (H3R17me2a), portando al rimodellamento della cromatina e all'attivazione trascrizionale. Riferimenti bibliografici: PMID:12237300 PMID:16497732 PMID:19405910
• Come membro della famiglia delle proteine arginina N-metiltransferasi, CARM1 agisce come coattivatore per recettori nucleari (es. PPARG), fattori di trascrizione (es. MEF2C, NF-kappa-B, p53/TP53, TCF7L2/TCF4) e regolatori metabolici (es. ACACA), spesso operando in sinergia con le acetiltransferasi.
• CARM1 si localizza nel nucleo, nel citoplasma e sui cromosomi, e si sposta dinamicamente per svolgere funzioni regolatorie sia nucleari (trascrizionali) che citoplasmatiche (post-trascrizionali).
• La proteina è soggetta ad acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione, e metila substrati non istonici tra cui EP300, PABPC1, ELAVL1 e ELAV4, modulando di conseguenza le interazioni proteiche e la stabilità dell'RNA. Riferimenti bibliografici: PMID:15731352
• CARM1 svolge anche una funzione indipendente dalla metilazione nella progressione della forcella di replicazione, promuovendo il reclutamento di PARP1 e la poli-ADP-ribosilazione della cromatina alle forcelle. Riferimenti bibliografici: PMID:33412112
• Specificità tissutale: CARM1 è sovraespresso negli adenocarcinomi prostatici e nelle neoplasie intraepiteliali prostatiche di alto grado, evidenziando la sua rilevanza nella biologia del cancro.
• Parole chiave: Regolatore della cromatina, metiltransferasi, regolazione della trascrizione, splicing alternativo, interazione ospite-virus e altro indicano una proteina multifunzionale coinvolta in processi cellulari essenziali.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Progettazione dell'immunogeno: L'anticorpo è stato ottenuto contro un frammento ricombinante corrispondente agli amminoacidi 486-603 di PRMT4/CARM1 umano (NP_954592.1). I ricercatori possono valutare l'allineamento di questa regione tra specie o isoforme se studiano modelli non umani o varianti di splicing.
• Western blotting (WB): Per il WB è attesa una banda a ~66 kDa. Si consiglia di utilizzare lisati arricchiti di nucleo da cellule umane, murine o di ratto e di ottimizzare la diluizione dell'anticorpo e le condizioni di bloccaggio.
• Immunohistochimica (IHC-P): Per tessuti inclusi in paraffina sono raccomandati il recupero dell'antigene standard e la titolazione. Data la sovraespressione di CARM1 nel cancro prostatico, array di tessuti specifici possono essere utilizzati come controlli positivi.
• ELISA: Questo anticorpo può essere utilizzato in saggi basati su ELISA; abbinarlo a un anticorpo secondario coniugato con un enzima appropriato e convalidarlo nella matrice di campione bersaglio.

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