[Convalidato KO] Anticorpo policlonale di coniglio Anti-RELA per WB, ELISA - Q04207

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di RELA

• RELA, noto anche come fattore di trascrizione p65 o subunità p65 del fattore nucleare NF-kappa-B, è un membro della famiglia proteica NF-kB/Rel.
• NF-kB è un fattore di trascrizione pleiotropico che regola processi biologici come infiammazione, immunità, differenziazione, crescita cellulare, tumorigenesi e apoptosi.
• RELA forma omodimeri o eterodimeri con altre proteine contenenti il dominio di tipo Rel; l'eterodimero RELA-NFKB1 è il più abbondante e funge da attivatore trascrizionale.
• I dimeri di NF-kB sono trattenuti nel citoplasma in stato inattivo tramite legame agli inibitori IkB; dopo la stimolazione, IkB viene fosforilato e degradato, permettendo a NF-kB di traslocare nel nucleo.
• La localizzazione subcellulare è dinamica: prevalentemente citoplasmatica nelle cellule a riposo e nucleare dopo attivazione; effettua un trasporto continuo tra nucleo e citoplasma.
• Le modifiche post-traduzionali, tra cui acetilazione, fosforilazione e metilazione, modulano la sua attività trascrizionale e le sue interazioni.
• RELA può anche modulare l'accessibilità del promotore ai fattori di trascrizione, regolando indirettamente l'espressione genica (PubMed:29813070). Riferimenti correlati: PMID:29813070
• A livello proteico, RELA è espresso nel miocardio, tra gli altri tessuti.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno è una proteina ricombinante che copre RELA murino; l'anticorpo è policlonale e convalidato tramite knockout (KO).
• Per Western blot, aspettarsi una banda a ~60 kDa. Utilizzare controlli positivi appropriati (ad esempio lisati di tessuti di topo noti per esprimere RELA) e convalidare la specificità nel proprio sistema di campioni.
• Per ELISA, considerare la titolazione a scacchiera per ottimizzare le concentrazioni di rivestimento e dell'anticorpo di rilevamento; la reattività crociata verso l'uomo permette un potenziale utilizzo su campioni umani dopo convalida.
• A causa della regolazione dinamica di RELA, considerare l'utilizzo della frazionamento sia citoplasmatica che nucleare per valutare lo stato di attivazione.
• Includere sempre controlli negativi (ad esempio linee cellulari o tessuti knockout) per confermare la specificità.

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