[Convalidato KO] Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-SIRT1 per WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - Q96EB6

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di SIRT1

• SIRT1 è una deacetilasi proteica dipendente da NAD che accoppia la regolazione trascrizionale allo stato energetico cellulare, influenzando la progressione del ciclo cellulare, la risposta al danno al DNA, il metabolismo, l'apoptosi e l'autofagia. Riferimenti correlati: PMID:11672523 PMID:12006491 PMID:14976264

• Modula la struttura della cromatina deacetilando gli istoni H1, H2A, H3 e H4, promuovendo la repressione trascrizionale e la formazione di eterocromatina silente, in particolare ai loci rDNA. Riferimenti correlati: PMID:15469825 PMID:18485871

• SIRT1 deacetila una moltitudine di fattori di trascrizione e co-regolatori, inclusi p53, FOXO3, NF-κB e MYC, regolando così le risposte allo stress, la sopravvivenza cellulare e la proliferazione. Riferimenti correlati: PMID:11672523 PMID:12006491 PMID:14976264 PMID:15152190 PMID:21807113

• Agendo come sensore del rapporto intracellulare NAD+/NADH, SIRT1 media gli adattamenti metabolici durante la restrizione calorica, potenzia la gluconeogenesi epatica e promuove l'ossidazione degli acidi grassi nel muscolo scheletrico. Riferimenti correlati: PMID:15205477 PMID:15692560 PMID:23142079

• SIRT1 partecipa alla riparazione del danno al DNA deacetilando proteine di riparazione chiave come Ku70, NBN e WRN, e facilita il reclutamento di fattori di riparazione nei siti danneggiati. Riferimenti correlati: PMID:15205477 PMID:16998810 PMID:17334224 PMID:20097625

• Gioca un ruolo nell'autofagia deacetilando ATG5, ATG7 e LC3, e aiuta a mantenere il ritmo circadiano attraverso la deacetilazione di BMAL1 e PER2. Riferimenti correlati: PMID:18296641 PMID:18662546

• A livello subcellulare, SIRT1 è principalmente nucleare, arricchito nei corpi nucleari PML, ma può anche translocare nel citoplasma e nei mitocondri in condizioni specifiche.

• Ampiamente espresso nei tessuti umani, SIRT1 è criticamente coinvolto nella differenziazione del muscolo scheletrico, nello sviluppo neuronale e nella protezione cardiovascolare.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è una proteina ricombinante a lunghezza intera di SIRT1 umano; pertanto, l'anticorpo potrebbe riconoscere tutte le isoforme. Per la convalida KO, assicurarsi che l'esone target sia interrotto nel modello knockout.
• Per il Western blot, prevedere una banda principale a ~82 kDa. Utilizzare controlli positivi e negativi appropriati, inclusi i lisati cellulari KO se disponibili, per confermare la specificità.
• Nell'immunofluorescenza e nell'IHC, è prevista una colorazione nucleare; tuttavia, le condizioni di permeabilizzazione e fissaggio potrebbero richiedere ottimizzazione a causa della localizzazione dell'antigene.
• L'espressione di SIRT1 è ubiquitaria, ma i livelli possono variare; considerare l'utilizzo di controlli di carico e la convalida dell'anticorpo nel tessuto/tipo cellulare di interesse prima degli assay quantitativi.
• Questo anticorpo è indicato per la citometria a flusso (intracellulare); assicurarsi di eseguire una corretta permeabilizzazione e includere un controllo isotipico.

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