[KO convalidato] Anticorpo policlonale di coniglio anti-SLC25A4/ANT1 - P12235

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di SLC25A4/ANT1

• Funziona come antiportatore ADP:ATP, importando l'ADP nella matrice mitocondriale per la sintesi di ATP ed esportando l'ATP per alimentare i processi cellulari. Riferimenti correlati: PMID:21586654, PMID:27693233, PMID:23173940

• Opera mediante un meccanismo di accesso alternato, passando tra conformazioni aperte verso il citoplasma (stato c) e aperte verso la matrice (stato m); lo scambio del substrato avviene consecutivamente con legame e rilascio ordinati. Riferimenti correlati: PMID:37278158 (Per similarità)

• Presenta attività di trasportatore di protoni che media il disaccoppiamento mitocondriale, riducendo l'efficienza della produzione di ATP e contribuendo alla termogenesi; questa attività richiede acidi grassi liberi come cofattori. Riferimenti correlati: PMID:31883789 (Per similarità)

• Svolge un ruolo chiave nell'apertura del poro di transizione della permeabilità mitocondriale (mPTP), un poro aspecifico associato alla morte cellulare; è ancora oggetto di studio se ANT1 sia un componente diretto del poro o un regolatore. Riferimenti correlati: PMID:31883789 (Per similarità)

• Regola la mitofagia indipendentemente dalla sua attività antiportatrice attraverso l'interazione con TIMM44, che inibisce la translocasi della presequeza TIMM23 e stabilizza PINK1 (Per similarità).

• È localizzato nella membrana interna mitocondriale come proteina transmembrana multipasso; è espresso a livello proteico negli eritrociti.

• È soggetto a molteplici modificazioni post-traduzionali, tra cui acetilazione, metilazione, fosforilazione e S-nitrosilazione; le varianti patogenetiche sono associate a cardiomiopatia e oftalmoplegia esterna progressiva.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende i residui 101–200 della sequenza ANT1; confermare l'accessibilità dell'epitopo nelle condizioni del proprio test e considerare che la conformazione della proteina endogena può influenzare il legame.
• Per il Western blot, è prevista una banda specifica intorno a 33 kDa; le condizioni standard di SDS-PAGE riducente sono generalmente adeguate, ma potrebbe essere necessaria l'ottimizzazione della preparazione del campione (ad esempio, del tempo di bollitura).
• Nell'immunofluorescenza/ICC, è previsto un pattern di colorazione mitocondriale; si raccomanda la co-colorazione con marcatori mitocondriali (ad esempio, MitoTracker o Tom20) per convalidare la localizzazione.
• Questo anticorpo è convalidato KO, fornendo garanzia di specificità; includere controlli appropriati con knockout o knockdown negli esperimenti per confermare il riconoscimento del bersaglio.
• L'anticorpo reagisce con campioni umani, murini e di ratto; l'omologia di sequenza suggerisce una probabile reattività con altri mammiferi, ma si consiglia la verifica per le altre specie.
• Per l'ELISA, valutare l'abbinamento con un anticorpo di cattura/rilevazione che si leghi a un epitopo non sovrapposto; si raccomanda l'ottimizzazione delle condizioni di rivestimento e blocco.

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