Anticorpo policlonale di coniglio anti-Smad1 convalidato per KO per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q15797

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di Smad1

• Identità proteica: membro 1 della famiglia SMAD (Smad1), noto anche come BSP-1, JV4-1, MADH1, MADR1. Funge da modulator trascrizionale nello sviluppo embrionale, nella differenziazione cellulare e nell'omeostasi tissutale. Riferimenti correlati: PMID:9335504

• Dopo il legame con il ligando BMP, Smad1 viene fosforilato dai recettori BMP di tipo I attivati, quindi si associa a SMAD4 per formare un complesso eteromerico che si trasloca nel nucleo e agisce come fattore di trascrizione. Riferimenti correlati: PMID:33667543

• Il complesso nucleare Smad1/SMAD4 riconosce gli elementi cis-regolatori contenenti gli elementi di legame Smad (SBE) per modulare l'espressione genica. Riferimenti correlati: PMID:33667543

• Smad1, in complesso con OAZ1 e PSMB4, media la degradazione del repressore SNIP1 di CREBBP/EP300, collegando la segnalazione BMP alla regolazione dei coattivatori trascrizionali.

• Smad1 regola positivamente l'espressione indotta da BMP4 del regolatore dello sviluppo odontogeno MSX1 dopo l'importazione nucleare mediata da IPO7.

• La localizzazione subcellulare è sia citoplasmatica che nucleare, coerente con il suo ruolo nella trasduzione del segnale dalla membrana cellulare al nucleo.

• L'espressione tissutale è ubiquitaria, con i livelli più alti osservati nel cuore e nel muscolo scheletrico.

• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione, acetilazione e ubiquitinazione; contiene un dominio di legame dello zinco e funziona come fattore di trascrizione che lega il DNA.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• In base alla progettazione dell'immunogeno (amminoacidi 20-240 di Smad1 umano), l'anticorpo può riconoscere sia le forme non fosforilate che quelle fosforilate; valutare la fosfospecificità con controlli appropriati.
• Per Western blotto, dovrebbe essere osservata una banda prevista a circa 52 kDa; utilizzare come controlli positivi lisati di tessuti o cellule con elevata espressione di Smad1 (ad esempio cuore o muscolo scheletrico).
• La convalida KO suggerisce l'idoneità a confermare la specificità del bersaglio in linee cellulari o tessuti knockout; includere, se possibile, un controllo di tipo selvaggio.
• Per IHC-P e IF/ICC, ottimizzare il recupero dell'antigene e la diluizione dell'anticorpo utilizzando campioni di tessuto positivi noti; la reattività crociata con topo e ratto ne permette l'utilizzo in modelli roditori.
• Essendo un anticorpo policlonale, la coerenza tra lotti può variare; convalidare ogni nuovo lotto nell'applicazione prevista e includere sempre controlli appropriati.

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