[Convalidato KO] Anticorpo monoclonale coniglio anti-Smad3 per WB, IHC-P, IP, ChIP, ELISA - P84022

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di Smad3

• Il membro 3 della famiglia SMAD (SMAD3), noto anche come omologo 3 di Mothers against decapentaplegic (MADH3) o hMAD-3, è codificato dal gene SMAD3 e funziona come SMAD regolato dal recettore (R-SMAD) nella via di segnalazione TGF-beta.
• Agisce come trasduttore di segnale intracellulare e modulatore trascrizionale: dopo l'attivazione da parte delle chinasi del recettore di tipo 1 del TGF-beta o dell'activina, forma un complesso con SMAD4 e transloca nel nucleo per regolare la trascrizione del gene bersaglio.
• Si lega all'elemento TRE nei promotori dei geni responsivi al TGF-beta e può formare un complesso SMAD3/SMAD4/JUN/FOS nei siti AP-1/SMAD per regolare con precisione la trascrizione.
• Transita tra il citoplasma e il nucleo; prevalentemente citoplasmico in assenza di ligando e si accumula nel nucleo dopo l'attivazione della via (PMID: non disponibile).
• Regola la condrogenesi e l'osteogenesi, inibisce la guarigione precoce delle fratture ossee e modula la guarigione delle ferite influenzando la crescita/migrazione dei cheratinociti e la chemiotassi dei monociti in modo sensibile agli ormoni.
• Soggetto a molteplici modifiche post-traduzionali, inclusa la fosforilazione, acetilazione, ADP-ribosilazione e ubiquitinazione, che controllano la sua attività, stabilità e interazioni; contiene anche domini di legame allo zinco essenziali per il legame al DNA.
• Molteplici isoforme sono prodotte per splicing alternativo, contribuendo alla diversità funzionale.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che copre gli amminoacidi 100-200 di Smad3 umano (NP_005893.1). Questa regione è conservata, il che spiega la reattività incrociata dell'anticorpo con Smad3 di topo e ratto.
• Per il Western blot (WB), è prevista una banda a circa 48 kDa. Includere controlli di carico appropriati e marcatori di peso molecolare per confermare la dimensione della banda.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), le condizioni di recupero dell'antigene (es. recupero dell'epitopo indotto dal calore) potrebbero richiedere ottimizzazione in base al tipo di tessuto e al metodo di fissazione.
• L'anticorpo è stato convalidato per l'immunoprecipitazione della cromatina (ChIP); si consiglia l'utilizzo di loci di controllo positivi e negativi per il legame di Smad3 per garantire la specificità.
• Adatto anche per immunoprecipitazione (IP) ed ELISA. Gli utenti finali devono titolare l'anticorpo per determinare la diluizione ottimale per i loro specifici sistemi sperimentali.

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