[Validato KO] Anticorpo policlonale anti-TMED10 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P49755

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di TMED10

• TMED10 (noto anche come TMP21, p23, p24δ1) è un membro della famiglia p24 dei recettori cargo transmembrana di tipo I e svolge ruoli essenziali nel traffico vescicolare delle proteine tra il RE e l'apparato di Golgi.
• TMED10 oscilla tra il reticolo endoplasmatico (RE), il compartimento intermedio RE-Golgi (ERGIC) e l'apparato di Golgi, mediando il trasporto del cargo attraverso vescicole rivestite da COPI e COPII.
  Riferimenti correlati: PMID:10052452, PMID:10852829, PMID:12237308
• Nel trasporto anterogrado COPII, TMED10 collabora con TMED2 come recettore cargo per le proteine ancorate al GPI, riconoscendo gli ancoraggi GPI rimodellati dopo l'elaborazione da parte di PGAP1 e PGAP5; questa funzione coinvolge SEC24C/D e i raft lipidici del RE.
  Riferimenti correlati: PMID:20427317, PMID:27569046
• Nel trasporto retrogrado COPI, TMED10 partecipa alla biogenesi delle vescicole e al reclutamento del rivestimento; sulle membrane del Golgi, agisce come recettore per ARF1-GDP e modula l'attività di ARFGAP2 di attivazione della GTPasi.
  Riferimenti correlati: PMID:11726511, PMID:19296914
• TMED10 si associa al complesso della gamma-secretasi dipendente dalla presenilina e influenza l'elaborazione della proteina amiloide beta A4, regolando la produzione di Aβ40 e influenzando il traffico di APP e il rilascio di APP-beta solubile.
  Riferimenti correlati: PMID:16641999, PMID:17288597
• Oltre al suo ruolo di recettore cargo, TMED10 può oligomerizzare formando un canale proteico, facilitando l'ingresso post-traduzionale di cargo citoplasmatici privi di peptide segnale (ad es. IL-1β, HSPB5, galectine) nell'ERGIC per la secrezione non convenzionale; questo processo è assistito da chaperoni.
  Riferimenti correlati: PMID:32272059
• A livello subcellulare, TMED10 risiede principalmente nelle membrane della via secretoria precoce: RE, ERGIC, Golgi cis e trans, ma è stata rilevata anche sulla membrana cellulare, nelle vescicole citoplasmatiche e nei melanosomi.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende il dominio luminale/extracellulare N-terminale (amminoacidi 35–190) di TMED10 umano; essendo un anticorpo policlonale, può riconoscere epitopi multipli e rilevare potenzialmente isoforme o forme processate.
• Nel Western blot (WB), si prevede una banda specifica a circa 25 kDa nei lisati di linee cellulari o tessuti umani, murini e di ratto; considerare la possibile glicosilazione o altre modifiche che possono alterare il peso molecolare apparente.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P) e l'immunocitochimica (IF/ICC), TMED10 mostra tipicamente un pattern di colorazione perinucleare simile a quello di RE/Golgi; ottimizzare i passaggi di fissazione, permeabilizzazione e blocco utilizzando tessuti o cellule di controllo positivo appropriati.
• Per l'utilizzo in ELISA, titolare l'anticorpo e validare le condizioni di rivestimento e rilevazione; la natura policlonale può fornire un segnale robusto, ma richiede un'attenta standardizzazione specifica per lotto.
• Essendo un anticorpo policlonale, la consistenza tra lotti deve essere verificata per le applicazioni quantitative critiche; considerare l'utilizzo di un antigene di controllo o di uno standard di riferimento.

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