[Validato KO] Anticorpo monoclonale coniglio Anti-TRIM21/SS-A per WB e ELISA - P19474

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di TRIM21

• TRIM21 (conosciuto anche come Ro52, SSA1, RNF81) è una E3 ubiquitina-proteina ligasi di 54 kDa, membro della famiglia dei tripartite motif (TRIM), caratterizzata da domini RING finger, B-box e coiled-coil.
• La sua funzione di E3 ubiquitina ligasi dipende dagli enzimi E2 UBE2D1, UBE2D2, UBE2E1 e UBE2E2: forma un complesso con UBE2D2 che media l'autoubiquitinazione e l'ubiquitinazione di substrati come USP4 e IKBKB. Riferimenti correlati: PMID:16297862, PMID:16316627, PMID:16472766, PMID:16880511, PMID:19675099
• TRIM21 è un componente dei complessi E3 ubiquitina-proteina ligasi SCF (SKP1-CUL1-F-box protein) basati su cullin-RING, come i complessi simili a SCF(SKP2), che ubiquitinano CDKN1B fosforilato in Thr-187, promuovendone la degradazione proteasomale e regolando la progressione del ciclo cellulare. Riferimenti correlati: PMID:16880511
• Regola negativamente la segnalazione immunitaria innata indirizzando IRF3 alla degradazione mediata dalla poliubiquitinazione, riducendo la produzione di IFN-beta dopo il riconoscimento del patogeno; inoltre monoubiquityna IKBKB per inibire la segnalazione NF-kappa-B indotta da Tax. Riferimenti correlati: PMID:18641315, PMID:19675099
• TRIM21 media la degradazione proteasomale dipendente dall'ubiquitina della catena pesante IgG1 tramite la via di degradazione associata all'ER (ERAD) e aumenta l'attività di decapping di DCP2. Riferimenti correlati: PMID:18022694, PMID:18361920
• Svolge un ruolo chiave nella regolazione dell'autofagia fungendo da piattaforma per l'assemblaggio di ULK1, Beclin 1 e membri della famiglia ATG8, e indirizza FIP200/RB1CC1 all'ubiquitinazione per modulare l'autofagia. Riferimenti correlati: PMID:26347139, PMID:36359729
• TRIM21 si localizza nel citoplasma, nel nucleo, nei corpi P, nei granuli di stress e negli autofagosomi; esiste come particella ribonucleoproteica che lega piccoli RNA HY, con isoforme tessuto-specifiche espresse nel cuore fetale e adulto e nel polmone fetale. Riferimenti correlati: PMID:1985094, PMID:8666824
• Durante l'infezione virale, promuove la piroptosi cellulare tramite l'ubiquitinazione legata a Lys-6 di ISG12a/IFI27, e regola positivamente l'immunità innata tramite l'ubiquitinazione legata a Lys-27 di MAVS. Inoltre, media la poliubiquitinazione legata a Lys-63 di G3BP1 in risposta a shock termico, portando allo smontaggio dei granuli di stress. Riferimenti correlati: PMID:36426955, PMID:29743353, PMID:36692217

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Per il Western blot è attesa una banda intorno ai 54 kDa; convalidare la specificità della banda utilizzando lisati cellulari di knockout o knockdown.
• Ottimizzare la diluizione dell'anticorpo primario in WB e ELISA in base alle vostre condizioni sperimentali specifiche, poiché la concentrazione di lavoro ottimale può variare.
• Poiché l'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 86-334, l'anticorpo riconosce probabilmente una regione comune a entrambe le isoforme 1 e 2, che sono espresse nei tessuti del cuore e del polmone.
• Quando si utilizzano campioni di ratto, confermare la reattività crociata testando un pannello di tessuti, poiché la reattività è stata osservata ma potrebbe richiedere verifica per il tessuto bersaglio in esame.

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