[Convalidato KO] Anticorpo monoclonale di coniglio anti-TRIM25 per WB, ELISA - Q14258

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di TRIM25

• TRIM25, noto anche come EFP, RNF147 o ZNF147, è una ligasi E3 ubiquitina/ISG15 appartenente alla famiglia delle proteine tripartite motif (TRIM). Riferimenti correlati: PMID:16352599
• Agisce come mediatore critico dell'immunità antivirale innata catalizzando la poliubiquitinazione legata alla Lys-63 dei sensori di RNA virale RIG-I e IFIH1, portando alla produzione di interferone. Riferimenti correlati: PMID:17392790, PMID:29357390, PMID:30193849, PMID:23950712
• TRIM25 regola inoltre diversi substrati, inclusi 14-3-3 sigma (SFN) tramite ISGilazione, ZFHX3 tramite degradazione proteasomiale e il fattore antivirale ZAP/ZC3HAV1 tramite ubiquitinazione per migliorare il legame con l'mRNA. Riferimenti correlati: PMID:16352599, PMID:17069755, PMID:22452784, PMID:28060952, PMID:28202764
• Nel nucleo, TRIM25 promuove il riavvio delle forcelle di replicazione del DNA bloccate ubiquitinando l'elicasi BLM, mediata dallo scaffold KHDC3L-OOEP.
• TRIM25 sopprime l'autofagia ubiquitinando e degradando il recettore del carico p62/SQSTM1. Riferimenti correlati: PMID:40542578
• La proteina si localizza prevalentemente nel citoplasma, ma si accumula anche nei granuli di stress e nel nucleo.
• TRIM25 è ubiquitariamente espresso, con livelli proteici elevati rilevati nei tumori al seno.
• Va incontro ad acetilazione e fosforilazione e contiene domini caratteristici RING, B-box e coiled-coil.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 100–200 di TRIM25 umano. Si prevede che questa regione sia accessibile e possa fornire un buon riconoscimento dell'epitopo; tuttavia, convalidare l'anticorpo nel proprio tipo di campione specifico.
• Questo anticorpo è convalidato per applicazioni Western blot (WB) ed ELISA. Per il WB, considerare l'utilizzo di lisati di controllo positivo da linee cellulari umane o tessuti che esprimono TRIM25. Grazie alla convalida KO, probabilmente mostra un'elevata specificità; confermare l'efficienza del knockdown nel proprio sistema.
• Dato il coinvolgimento di TRIM25 nell'immunità innata, il trattamento delle cellule con mimetici virali (es. poly(I:C)) o interferoni può modulare i livelli di espressione, che possono essere valutati con questo anticorpo.
• Per l'ELISA, considerare l'utilizzo di proteina TRIM25 ricombinante o lisati cellulari come antigene di rivestimento. Ottimizzare la diluizione dell'anticorpo in base alle condizioni specifiche del saggio.

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