Anticorpo policlonale coniglio Anti-VRK1 validato KO per WB, IHC-P, ELISA - Q99986

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di VRK1

• Identità della proteina: VRK1 (Vaccinia-related kinase 1) è una serina/treonina chinasi ampiamente espressa codificata dal gene VRK1 (Gene ID: 7443) nell'uomo. Appartiene alla famiglia delle chinasi VRK e contiene domini catalitici e regolatori conservati.
• Regolazione della cromatina: VRK1 controlla l'organizzazione della cromatina fosforilando l'istone H3 sulla Thr-4 e l'istone H2AX, un processo critico per la condensazione nucleare, la progressione mitotica e l'espressione genica. Riferimenti correlati: PMID:31527692 PMID:37179361
• Risposta al danno al DNA: In risposta alle lesioni del DNA, VRK1 fosforila KAT5, potenziandone l'attività istone acetiltransferasi e l'associazione alla cromatina, e modifica anche TP53BP1 per orchestrare la segnalazione di riparazione. Riferimenti correlati: PMID:33076429 PMID:31527692
• Fosforilazione del substrato e controllo trascrizionale: VRK1 fosforila p53 alla Thr-18, interrompendo la sua interazione con MDM2 e stabilizzando p53, attivando anche ATF2 e JUN per modulare la trascrizione genica. Riferimenti correlati: PMID:10951572 PMID:15105425 PMID:31527692
• Assemblaggio dei corpi di Cajal: VRK1 si localizza nei corpi di Cajal e fosforila la coilina, un passaggio essenziale per l'integrità e la funzione dei corpi di Cajal nell'elaborazione dell'RNA. Riferimenti correlati: PMID:21920476 PMID:31090908
• Disassemblaggio dell'apparato di Golgi: Durante la mitosi, la fosforilazione di VRK1 mediata da PLK3 innesca la frammentazione dell'apparato di Golgi, facilitando la pari partizione dell'organello nelle cellule figlie. Riferimenti correlati: PMID:19103756
• Espressione tissutale e legami con le malattie: Altamente espresso nel fegato fetale, nei testicoli e nel timo, le mutazioni di VRK1 sono collegate a disturbi neurodegenerativi e neuropatie periferiche, evidenziando il suo ruolo nella manutenzione neuronale.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Design dell'immunogeno: L'anticorpo è stato prodotto contro un frammento ricombinante (aa 257-396) situato nella regione C-terminale di VRK1 umano. Questa regione mostra una conservazione moderata tra le specie; verificare l'omologia di sequenza se si utilizzano campioni non umani.
• Western blotting: Ci si aspetta una banda specifica a circa 45 kDa. Per una maggiore sicurezza, includere un lisato cellulare knockout (KO) come controllo negativo e un controllo positivo che esprime VRK1.
• Considerazioni IHC-P: I metodi standard di recupero dell'antigene (es. tampone citrato, pH 6.0) sono generalmente adatti. Ottimizzare la diluizione dell'anticorpo e includere sezioni tissutali con nota espressione di VRK1 (es. testicolo, timo) come controlli positivi.
• Ottimizzazione ELISA: Utilizzare la proteina VRK1 ricombinante o un peptide come antigene di rivestimento. Titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione di lavoro ottimale e convalidare con appropriati reagenti di blocco e rilevamento.

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