[KO Validated] Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CDK5 - Q00535

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CDK5

• La chinasi 5 ciclina-dipendente (CDK5) è una serina/treonina-proteina chinasi diretta dalla prolina, nota anche come chinasi 5 delle proteine della divisione cellulare, subunità catalitica II della tau-protein chinasi o PSSALRE.
• CDK5 è essenziale per l'arresto del ciclo cellulare e la differenziazione delle cellule neuronali e svolge ruoli fondamentali nella sopravvivenza, migrazione e crescita assonale e neuritica dei neuroni, nella sinaptogenesi e nella plasticità sinaptica.
• La chinasi viene attivata dal legame con le subunità regolatorie CDK5R1 (p35) e CDK5R2 (p39), principalmente nei neuroni post-mitotici, e fosforila un'ampia gamma di substrati, tra cui MAPT/TAU, MAP2, p53, HDAC1 e piccole GTPasi.
• Nel nucleo, CDK5 fosforila fattori di trascrizione come MEF2, p53 e CLOCK, regolando l'espressione genica, l'apoptosi e i ritmi circadiani.
• La localizzazione subcellulare di CDK5 comprende il citoplasma, il nucleo, la membrana cellulare, il pericarion, le lamellipodie, i coni di crescita, la densità postsinaptica e le sinapsi.
• L'attività aberrante di CDK5, spesso indotta dal frammento proteolitico p25, è implicata nella neurodegenerazione e nella lisencefalia, come indicato dalle principali associazioni patologiche.
• Espressa ubiquitariamente, con un accumulo particolarmente elevato nei neuroni corticali; è inoltre presente nei testicoli, nel muscolo scheletrico, nel colon, nel midollo osseo e nell'ovaio.
  Riferimenti correlati: PMID:17009320, PMID:19693690

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Questo anticorpo è validato KO, pertanto è particolarmente indicato per confermare il knockout del gene CDK5 in linee cellulari o tessuti; si consiglia di utilizzare lisati da campioni wild-type e knockout come controlli positivo e negativo.
• Per il Western blot, in condizioni riducenti è prevista una singola banda intorno a 33 kDa; verificare i marcatori di peso molecolare e caricare quantità appropriate di proteine.
• Nell'immunofluorescenza (IF-P), CDK5 può localizzarsi nel citoplasma, nel nucleo o nella membrana a seconda del tipo cellulare e delle condizioni; ottimizzare la fissazione e la permeabilizzazione per le colture neuronali.
• Per l'IHC-P, i metodi di recupero antigenico e la diluizione dell'anticorpo devono essere determinati empiricamente; eseguire test su tessuti di controllo positivi, come cervello o muscolo scheletrico.
• Le applicazioni ELISA possono richiedere l'ottimizzazione dei tamponi di rivestimento e dei sistemi di rilevazione; eseguire esperimenti di titolazione per stabilire le concentrazioni operative.

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