Anticorpo policlonale di coniglio anti-CDK7 validato KO per WB, IF/ICC, ELISA - P50613

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CDK7

• La chinasi ciclina-dipendente 7 (CDK7) è una chinasi serina/treonina che funge da subunità catalitica del complesso della chinasi attivante le CDK (CAK), svolgendo un ruolo fondamentale sia nella regolazione del ciclo cellulare sia nella trascrizione mediata dalla RNA polimerasi II. Riferimenti correlati: PMID:9852112
• CDK7 fosforila il dominio C-terminale (CTD) della RNA polimerasi II (POLR2A) in Ser5, un passaggio critico per l'inizio della trascrizione e la fuga dal promotore. Riferimenti correlati: PMID:19136461, PMID:26257281, PMID:28768201
• In quanto parte del complesso CAK, CDK7 attiva le principali chinasi ciclina-dipendenti (CDK1, CDK2, CDK4, CDK6) fosforilando le treonine del loro loop T e promuovendo così la progressione del ciclo cellulare. Riferimenti correlati: PMID:41100585
• CDK7 è localizzata sia nel nucleo sia nel citoplasma, con un arricchimento nella regione perinucleare.
• È espressa ubiquitariamente nei tessuti, in linea con il suo ruolo fondamentale nella divisione cellulare e nell'espressione genica.
• In risposta al danno al DNA, CDK7 fosforila e attiva p53, che a sua volta inibisce CDK7, formando un circuito di feedback che può portare all'arresto del ciclo cellulare o all'apoptosi. Riferimenti correlati: PMID:9372954, PMID:9840937
• CDK7 fosforila anche altri substrati, tra cui SPT5, SF1 e CDK11B, collegandosi così a ulteriori reti regolatorie. Riferimenti correlati: PMID:9372954
• Le principali modifiche post-traduzionali di CDK7 includono l'acetilazione e la fosforilazione, che ne modulano l'attività e le interazioni.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 211–346 all'interno del dominio chinasico, consentendo potenzialmente di rilevare il CDK7 a lunghezza completa (~39 kDa) e le possibili isoforme; si consiglia di utilizzare la proteina ricombinante come controllo positivo.
• Per il Western blot, validare l'anticorpo in linee cellulari come HeLa o HEK293 e utilizzare tamponi di lisi appropriati per preservare gli stati di fosforilazione.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, prevedere pattern di colorazione nucleare e perinucleare; includere controlli isotipici e confermare, ove possibile, la specificità in cellule con CDK7 depleto.
• È riportata una reattività crociata con CDK7 di topo e ratto; validare l'anticorpo in lisati tissutali pertinenti se queste specie fanno parte del sistema sperimentale.
• Per le applicazioni ELISA, ottimizzare le condizioni di rivestimento e valutare l'utilizzo dell'immunogeno o della proteina CDK7 purificata come standard.

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