[Convalidato KO] Anticorpo policlonale anti-HK1 di coniglio per WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P19367

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Esochinasi-1 (HK1)

• HK1 (Esochinasi-1) è un enzima di ~102 kDa che catalizza la fosforilazione degli esosi, principalmente D-glucosio a glucosio-6-fosfato, il primo e limitante passo della glicolisi (PubMed:1637300, PubMed:25316723, PubMed:27374331). Riferimenti correlati: PMID:1637300 PMID:25316723 PMID:27374331
• L'enzima fosforila anche altri esosi come D-glucosammina, D-fruttosio, D-mannosio e 2-deossi-D-glucosio, ma non N-acetil-D-glucosammina (PubMed:27374331). Riferimenti correlati: PMID:27374331
• Oltre alla glicolisi, HK1 funge da recettore di riconoscimento di pattern per il peptidoglicano batterico, collegando il metabolismo del glucosio all'attivazione immunitaria innata. Quando la N-acetil-D-glucosammina batterica viene rilasciata nel citosol, inibisce HK1 e ne promuove la dissociazione dalla membrana mitocondriale esterna, innescando l'attivazione dell'inflammasoma NLRP3 (PubMed:27374331). Riferimenti correlati: PMID:27374331
• HK1 si localizza prevalentemente sulla membrana mitocondriale esterna ma si trova anche nel citosol, dove le sue funzioni metaboliche e immunitarie sono compartimentalizzate.
• Esistono più isoforme tessuto-specifiche: l'isoforma 2 è specifica degli eritrociti, mentre le isoforme 3 e 4 sono specifiche del testicolo (PubMed:10978502). Riferimenti correlati: PMID:10978502
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione, che possono regolare l'attività enzimatica e la localizzazione subcellulare.
• Le varianti genetiche in HK1 sono associate a malattie come la malattia di Charcot-Marie-Tooth, l'anemia emolitica ereditaria, la disabilità intellettiva, la neurodegenerazione, la neuropatia e la retinite pigmentosa.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il Western blot, attendersi una banda a ~102 kDa. Considerare l'uso di condizioni riducenti e un tempo di trasferimento sufficiente a causa delle grandi dimensioni della proteina.
• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 21–219), che è conservata tra umano, topo e ratto, supportando un'ampia reattività crociata tra specie.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P) e l'immunofluorescenza (IF/ICC), notare che HK1 è prevalentemente mitocondriale; ci si devono aspettare pattern di colorazione mitocondriali. Potrebbe essere necessario il recupero dell'antigene e la permeabilizzazione.
• Per l'immunoprecipitazione (IP), convalidare il legame dell'anticorpo in condizioni native e includere appropriati controlli isotipo.
• L'anticorpo è stato convalidato con knockout; tuttavia, includere sempre controlli positivi e negativi nel proprio sistema sperimentale per confermare la specificità.

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