[Convalidato KO] Anticorpo monoclonale di coniglio anti-NRF2 - Q16236

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di NRF2

• NRF2 è un fattore di trascrizione che si lega agli elementi di risposta antiossidante (ARE) nei promotori dei geni citoprotettivi, come gli enzimi disintossicanti di fase 2, e ne promuove l'espressione per neutralizzare gli elettrofili reattivi. Riferimenti correlati: PMID:11035812, PMID:19489739, PMID:29018201
• In condizioni basali, NRF2 viene ubiquitinato e degradato nel citoplasma dal complesso KEAP1; in caso di stress ossidativo, i metaboliti elettrofili inibiscono KEAP1, consentendo l'accumulo nucleare di NRF2, l'eterodimerizzazione con piccole proteine Maf e l'attivazione genica guidata da ARE. Riferimenti correlati: PMID:11035812, PMID:15601839, PMID:19489739, PMID:29018201, PMID:29590092
• La via di NRF2 è attivata anche dall'autofagia selettiva (tramite l'interazione KEAP1‑SQSTM1/p62) e dalla risposta alle proteine non ripiegate, contribuendo all'omeostasi redox e alla sopravvivenza cellulare a seguito dello stress del reticolo endoplasmatico. Riferimenti correlati: PMID:20452972
• NRF2 può essere coinvolto nell'attivazione trascrizionale del cluster genico della β‑globina mediando l'attività enhancer del sito ipersensibile 2 della regione di controllo del locus della β‑globina. Riferimenti correlati: PMID:7937919
• NRF2 è un regolatore critico della risposta immunitaria innata: sopprime la trascrizione delle citochine infiammatorie dei macrofagi, reprime il rilevamento del DNA citosolico antivirale sottoregolando STING1 e limita il rilascio di citochine pro‑infiammatorie durante l'infezione da SARS‑CoV‑2, inibendo al contempo la replicazione di diversi virus patogeni attraverso un meccanismo indipendente dall'interferone. Riferimenti correlati: PMID:30158636, PMID:33009401
• La localizzazione subcellulare è principalmente citoplasmatica in condizioni di assenza di stress, con traslocazione nucleare in seguito a stress ossidativo o elettrofilo; è ampiamente espresso, con i livelli più alti nel muscolo adulto, rene, polmone, fegato e muscolo fetale.
• Le modifiche post‑traduzionali includono acetilazione, glicazione, fosforilazione e ubiquitinazione, che ne modulano la stabilità, l'attività e le interazioni.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 243‑400 di NRF2 umano, una regione che include il dominio di legame al DNA e parte del dominio Neh1; tenerne conto durante la progettazione di saggi specifici per l'epitopo.
• Per il Western blot, rilevare una banda a circa 68 kDa; convalidare il segnale utilizzando lisati cellulari knockout, se disponibili, per confermare la specificità.
• Per le applicazioni ChIP, ottimizzare le condizioni di cross-linking e sonicazione per il proprio tipo cellulare e includere regioni di controllo positivo/negativo appropriate.
• Nell'ELISA, abbinare questo anticorpo a un anticorpo di rilevamento adatto dopo aver confermato la reattività con il formato dell'antigene target.
• Sebbene convalidato per umano, topo e ratto, verificare la reattività nella propria specie sperimentale e nel tipo di tessuto specifico prima di procedere su larga scala.

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