Anticorpo policlonale coniglio XIAP validato KO per WB, ELISA - P98170

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di XIAP

• XIAP è una proteina multifunzionale che inibisce direttamente l'apoptosi legandosi e bloccando i siti attivi delle caspasi-3 e -7, e mantenendo la caspasi-9 in uno stato monomerico inattivo.
  Riferimenti correlati: PMID:11257230 PMID:11257231 PMID:12620238 PMID:16352606

• Come ligasi E3 ubiquitina-proteina, XIAP catalizza la poliubiquitinazione legata a Lys-63 di RIPK2 a valle di NOD1/2, creando un'impalcatura per l'attivazione di NF-κB e della chinasi MAP, e ubiquitina anche RIPK1, MAP3K2 e altri mediatori della segnalazione per modulare con precisione le vie infiammatorie e di sopravvivenza.
  Riferimenti correlati: PMID:17560374 PMID:17967870 PMID:19473982 PMID:19667203 PMID:22607974 PMID:29452636

• XIAP partecipa all'omeostasi del rame ubiquitinando COMMD1 per la degradazione proteasomica e migliorando l'attività del chaperone CCS verso SOD1, regolando così il metabolismo cellulare del rame.
  Riferimenti correlati: PMID:14685266 PMID:20154138

• Regola positivamente la segnalazione Wnt ubiquitinando i co-repressori trascrizionali TLE, portando al loro distacco da TCF/LEF e consentendo i programmi trascrizionali guidati da β-catenina.
  Riferimenti correlati: PMID:22304967

• XIAP sopprime la formazione del ripoptosoma e la morte cellulare dipendente dalla caspasi-8 ubiquitinando RIPK1 e la caspasi-8.
  Riferimenti correlati: PMID:22095281

• La proteina localizza sia nel citoplasma che nel nucleo.

• Espressa ubiquitariamente, ad eccezione dei leucociti del sangue periferico; rilevata a livello proteico nelle cripte del colon.
  Riferimenti correlati: PMID:8654366 PMID:30389919

• XIAP appartiene alla famiglia degli inibitori dell'apoptosi (IAP) e contiene tre domini BIR e un dominio finger RING C-terminale; è soggetto a modifiche regolatorie come fosforilazione, S-nitrosilazione e modificazioni simili all'ubiquitina.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (residui 198‑497) copre i domini BIR2, BIR3 e parte del dominio RING, che sono altamente conservati nell'uomo, nel topo e nel ratto, supportando la reattività crociata osservata. Si consiglia di verificare la reattività crociata nel proprio specifico modello sperimentale includendo i controlli appropriati.
• Per il Western blot, ci si aspetta una banda di circa 57 kDa; ottimizzare il blocco e la diluizione dell'anticorpo utilizzando un lisato da linea cellulare con espressione confermata di XIAP (es. HeLa o Jurkat). Grazie alla validazione KO, questo anticorpo può offrire un'elevata specificità; tuttavia, validare nel proprio setup sperimentale.
• Sebbene l'anticorpo sia indicato per ELISA, le prestazioni possono dipendere dalla presentazione dell'antigene; considerare l'uso della proteina ricombinante XIAP o di lisati cellulari come antigene di rivestimento e validare le condizioni del saggio.
• XIAP funziona in molteplici vie di segnalazione (NF‑κB, Wnt, apoptosi); quando si studia il suo ruolo, utilizzare stimoli appropriati (es. TNFα, ligandi NOD1/2) e inibitori per analizzare gli effetti specifici della via.

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