[Validato KO] mAb monoclonale di coniglio anti-YTHDF2 - Q9Y5A9

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di YTHDF2

• YTHDF2 è una proteina lettrice di m6A che si lega specificamente agli RNA modificati con N6-metiladenosina (m6A) per regolarne la stabilità e l'elaborazione. Riferimenti correlati: PMID:24284625, PMID:26046440, PMID:26318451
• Promuove la degradazione degli mRNA contenenti m6A reclutando il complesso deadenilasico CCR4-NOT attraverso l'interazione diretta con CNOT1. Riferimenti correlati: PMID:27558897
• In collaborazione con RIDA/HRSP12, indirizza i trascritti contenenti uno specifico sito di legame (5'-GGUUC-3') verso la scissione endoribonucleolitica da parte del complesso ribonucleasico P/MRP. Riferimenti correlati: PMID:30930054
• In seguito al legame con gli mRNA polimetilati, YTHDF2 va incontro a separazione di fase liquido-liquido, favorendo la formazione di compartimenti privi di membrana, come i P-body e i granuli da stress. Riferimenti correlati: PMID:31292544, PMID:31388144, PMID:31642031
• Si localizza principalmente nel citosol, nei P-body e nei granuli da stress; in condizioni di shock termico si rilocalizza nel nucleo per proteggere i segnali m6A e promuovere la traduzione cap-indipendente. Riferimenti correlati: PMID:26458103
• È essenziale per la maturazione degli ovociti e la spermatogenesi controllando la degradazione dell'mRNA materno (per similarità).
• Regola la specificazione delle cellule staminali ematopoietiche e inibisce la differenziazione neurale delle iPSC promuovendo la degradazione dei trascritti bersaglio modificati con m6A. Riferimenti correlati: PMID:30065315, PMID:32169943
• Inibisce la risposta all'interferone di tipo I legandosi ai trascritti IFNB contenenti m6A e degradandoli. Riferimenti correlati: PMID:30559377
• Regola il metabolismo lipidico epatico circadiano promuovendo la degradazione dipendente da m6A dei trascritti PPARA. Riferimenti correlati: PMID:30428350
• È altamente espresso nelle cellule staminali pluripotenti indotte (iPSC) e viene down-regolato durante la differenziazione neurale.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il WB, una diluizione iniziale di 1:1000 è spesso efficace; tuttavia, si raccomanda l'ottimizzazione. Convalidare la specificità utilizzando linee cellulari knockout o il silenziamento con siRNA.
• Per IHC-P, eseguire il recupero antigenico indotto dal calore e considerare un intervallo di diluizione di 1:50-1:200.
• Per IP, è possibile testare quantità tipiche di anticorpo pari a 1-2 µg per 500 µg di proteina totale.
• Per ELISA, si suggerisce il rivestimento con il peptide immunogeno o con YTHDF2 ricombinante.
• Data la funzione di legame a m6A, considerare la potenziale competizione con l'RNA metilato endogeno negli esperimenti di IP e in altri saggi associati all'RNA.

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