Anticorpo policlonale coniglio KPNB1 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q14974

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di KPNB1

• La subunità beta-1 dell'importina (KPNB1), nota anche come cheriferina beta-1 o importina-90, funge da recettore del trasporto nucleare, mediando l'importazione delle proteine sia in associazione con un adattatore importina-alpha che in modo autonomo riconoscendo direttamente i segnali di localizzazione nucleare (NLS). Riferimenti correlati: PMID:10228156, PMID:11682607, PMID:11891849

• Il complesso importina/substrato si attracca al complesso dei pori nucleari (NPC) attraverso il legame di KPNB1 alle ripetizioni FxFG delle nucleoporine, seguito da una translocazione dipendente dall'energia e guidata da Ran attraverso l'involucro nucleare. Riferimenti correlati: PMID:10228156, PMID:11682607, PMID:11891849

• Sul lato nucleoplasmatico, il legame di RanGTP dissocia il complesso, rilasciando il carico; le subunità dell'importina vengono quindi riciclate nel citoplasma per i successivi cicli di trasporto. Riferimenti correlati: PMID:10228156, PMID:11682607, PMID:11891849

• KPNB1 importa autonomamente le proteine ribosomiali RPL23A, RPS7 e RPL5 e coopera con IPO7 per importare l'istone H1; può anche mediare l'importazione nucleare degli istoni core H2A, H2B, H3 e H4 in vitro. Riferimenti correlati: PMID:11682607, PMID:9687515, PMID:10228156

• Ulteriori carichi includono regolatori della trascrizione come MRTFA, SNAI1 e PRKCI, evidenziando il suo ampio ruolo nel trasporto nucleare dipendente dai segnali. Riferimenti correlati: PMID:11891849, PMID:19386897, PMID:20818336

• Durante l'infezione da HIV-1, KPNB1 si lega e media l'importazione nucleare della proteina virale Rev, facilitando la replicazione virale.

• La proteina si localizza prevalentemente nel citoplasma e sull'involucro nucleare, coerentemente con la sua funzione all'interfaccia nucleo-citoplasmatica.

• KPNB1 subisce modifiche post-traduzionali tra cui acetilazione, fosforilazione e ADP-ribosilazione, e lo splicing alternativo produce multiple isoforme.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot (WB), prevedere una banda vicino a 97 kDa; includere appropriati controlli positivi (es. lisati di HeLa, HEK293) e considerare l'uso di un controllo di carico per la normalizzazione.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), ottimizzare le condizioni di fissazione (es. PFA al 4%) e permeabilizzazione (es. Triton X-100 allo 0,1%) e utilizzare un anticorpo secondario adatto per rilevare l'anticorpo primario di coniglio.
• Le applicazioni ELISA possono essere eseguite con rivestimento indiretto dell'immunogeno peptidico o della proteina ricombinante KPNB1; validare le condizioni del saggio con campioni positivi e negativi noti.
• Poiché si tratta di un anticorpo policlonale, la coerenza tra lotti deve essere confermata quando si cambiano batch in studi a lungo termine.

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