Anticorpo policlonale coniglio Acido lattico-Istona H3-K18 (Q16695/P68431) per WB, DB, ELISA

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'istona H3

L'istona H3 è un componente principale del nucleosoma, l'unità fondamentale ripetuta della cromatina. I nucleosomi compattano il DNA, regolando l'accessibilità ai macchinari di trascrizione, riparazione e replicazione. Attraverso un insieme dinamico di modificazioni post-traduzionali (PTM) — collettivamente definite codice delle istone — l'istona H3 svolge un ruolo centrale nella regolazione della trascrizione, nella riparazione del DNA, nella replicazione del DNA e nella stabilità cromosomica.
Riferimenti correlati: UniProt Q16695, UniProt P68431

L'istona H3 si localizza nel nucleo ed è strettamente associata al DNA cromosomico. La sua presenza sui core dei nucleosomi la posiziona come piattaforma strutturale e regolatrice per i processi basati sulla cromatina.
Riferimenti correlati: UniProt Q16695, UniProt P68431

Esistono multiple varianti dell'istona H3. L'H3.1 canonico (codificato da diversi geni tra cui H3C1, H3C2, ecc., UniProt P68431) è espresso ampiamente, mentre l'H3.1t (H3‑4, UniProt Q16695) mostra un'espressione specifica del testicolo. La sequenza amminoacidica circostante K18 è altamente conservata tra queste varianti, supportando l'ampia reattività crociata prevista di questo anticorpo tra specie e varianti.
Riferimenti correlati: UniProt Q16695 (specificità tissutale), UniProt P68431

La lisina 18 dell'istona H3 è un hot-spot per diverse PTM. Subisce dimetilazione asimmetrica catalizzata da CARM1 e può anche essere citrullinata. Queste modifiche partecipano all'attivazione trascrizionale, al rimodellamento della cromatina e alla segnalazione epigenetica.
Riferimenti correlati: PMID:15345777, PMID:15471871, PMID:16497732, PMID:16567635

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Dato che questo anticorpo è stato generato contro un peptide lactilato, considerare di eseguire saggi di competizione peptidica per verificare la sua specificità per H3K18 lactilata rispetto al peptide non modificato o ad altre PTM.
• Per il western blotting, possono essere impiegati protocolli standard di estrazione acida per le istone. Ottimizzare le condizioni di blocco e la diluizione dell'anticorpo primario nella propria matrice di campione specifica.
• Nei saggi basati su ELISA, rivestire con il peptide lactilato appropriato. Includere peptide non lactilati e con PTM irrilevanti come controlli negativi per valutare la specificità di legame.
• Sebbene sia prevista un'ampia reattività crociata attraverso campioni umani, murini e di ratto, convalidare sempre le prestazioni nel proprio sistema sperimentale con i controlli appropriati di carico e PTM.

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