Anticorpo policlonale rabbit LC3B per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9GZQ8

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di LC3B

• LC3B (Microtubule-associated protein 1 light chain 3 beta), noto anche come ATG8F o MAP1LC3B, è un componente centrale della via dell'autofagia e appartiene alla famiglia delle proteine simili all'ubiquitina ATG8.
• Agisce come modificatore simile all'ubiquitina fondamentale per l'allungamento delle membrane del fagoforo durante la formazione dell'autofagosoma. Riferimenti correlati: PMID:20418806, PMID:23209295, PMID:28017329
• LC3B svolge un ruolo chiave nelle sottotipi di autofagia selettiva come la mitofagia, in cui ancorare gli autofagolisosomi alle membrane mitocondriali esterne tramite legame con la C-18 ceramide dopo la fissione mitocondriale. Riferimenti correlati: PMID:22922758
• Promuove la ciliogenesi primaria mediando la rimozione autofagica di OFD1 dai satelliti centriolari. Riferimenti correlati: PMID:24089205
• In condizioni di stress nutrizionale, LC3B interagisce con il recettore della reticulofagia TEX264 per rimodellare i sottodomini del reticolo endoplasmatico in autofagosomi, facilitando il ricambio del reticolo stesso. Riferimenti correlati: PMID:31006537, PMID:31006538
• LC3B recluta direttamente il fattore di nucleazione dell'actina JMY sulle membrane del fagoforo, stimolando la polimerizzazione dell'actina e la biogenesi degli autofagosomi. Riferimenti correlati: PMID:30420355
• Subcellularmente, LC3B si trova sulle membrane degli autofagosomi, sulle vescicole citoplasmatiche, sulle membrane mitocondriali e sul citoscheletro; subisce un caratteristico spostamento di lipidazione da LC3B-I citosolico a LC3B-II legato alla membrana.
• L'espressione tissutale è più alta nel cuore, nel cervello, nel muscolo scheletrico e nel testicolo, con livelli più bassi nel fegato.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno (amminoacidi 1-100 di LC3B umano) si trova nella regione N-terminale; si consiglia di confermare la specificità dell'anticorpo utilizzando modelli di knockout o knockdown di LC3B.
• Per il Western blotting, LC3B appare tipicamente come due bande: una LC3B-I citosolica di ~15 kDa e una LC3B-II (forma lipidata) di ~14 kDa a migrazione più veloce in condizioni riducenti; entrambe le forme devono essere considerate nell'analisi del flusso autofagico.
• Nelle applicazioni di immunofluorescenza, i protocolli di fissazione e permeabilizzazione potrebbero richiedere ottimizzazione per rivelare la colorazione puntiforme degli autofagosomi in condizioni di induzione dell'autofagia (ad esempio, fame o trattamento farmacologico).
• Per l'ELISA, assicurarsi di utilizzare un buffer di rivestimento e una diluizione dell'anticorpo appropriati; convalidare rispetto ai marcatori di autofagia noti nel sistema di campione pertinente.

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