Anticorpo policlonale di coniglio anti-LIMK1 per WB ed ELISA - P53667

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di LIMK1

• LIMK1 (chinasi 1 del dominio LIM) è una serina/treonina-protein chinasi che contiene domini LIM e PDZ N-terminali ed è un regolatore chiave della dinamica dei filamenti di actina.
• Fosforila e inattiva la cofilina (CFL1/CFL2) e la destrina (DSTN), prevenendo così la depolimerizzazione dell'F-actina e stabilizzando il citoscheletro di actina; questo processo controlla la motilità cellulare, la progressione del ciclo cellulare e la differenziazione (PubMed:10436159, PubMed:11832213, PubMed:12807904, PubMed:15660133, PubMed:16230460). Riferimenti correlati: PMID:10436159 PMID:11832213 PMID:12807904 PMID:15660133 PMID:16230460
• Viene attivata a valle delle vie delle GTPasi Rho dalle chinasi a monte ROCK1, PAK1 e PAK4, che fosforilano il residuo di treonina nel suo anello di attivazione (PubMed:10436159). Riferimenti correlati: PMID:10436159
• Si localizza nel citoplasma, nel nucleo, nel citoscheletro e nelle protrusioni cellulari come i lamellipodi.
• La massima espressione si osserva nel sistema nervoso (adulto e fetale), in particolare nella corteccia cerebrale, mentre livelli inferiori sono presenti nel cuore e nella muscolatura scheletrica.
• Inoltre, LIMK1 fosforila TPPP promuovendo la disassemblazione dei microtubuli e stimola la crescita assonale, suggerendo un ruolo nello sviluppo cerebrale (PubMed:18028908). Riferimenti correlati: PMID:18028908
• È associata alla sindrome di Williams-Beuren; presenta domini LIM leganti lo zinco, un dominio chinasico legante l'ATP ed è soggetta a splicing alternativo e ubiquitinazione.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è stato progettato contro un frammento ricombinante comprendente gli amminoacidi 510–647 della LIMK1 umana, coprendo parte del dominio chinasico e le sequenze regolatorie C-terminali; questo design dovrebbe consentire il riconoscimento della proteina LIMK1 totale e potenzialmente di più isoforme.
• Per il Western blot, utilizzare condizioni standard di SDS-PAGE denaturante e riducente; si prevede una banda intorno a 73 kDa. Convalidare utilizzando controlli positivi appropriati (ad esempio lisato cerebrale o di muscolo scheletrico) e confermare la specificità mediante knockdown con siRNA o sovraespressione, se necessario.
• Nell'ELISA, questo anticorpo può essere utilizzato per il rilevamento indiretto di LIMK1; ottimizzare la concentrazione dell'antigene di rivestimento e le diluizioni dell'anticorpo in base al formato della piastra e al sistema di rilevamento.
• Si prevede reattività crociata con campioni umani, murini e di ratto sulla base dell'omologia di sequenza; verificare le prestazioni nel sistema campione pertinente prima di eseguire analisi ad alta processività.

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