MADCAM1 Rabbit pAb per WB, IHC-P, ELISA - Q13477

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di MADCAM1

• MADCAM1 (mucosal addressin cell adhesion molecule 1) è un recettore di adesione cellulare espresso sulle venule mucosali, che dirige il traffico dei linfociti nei tessuti mucosali come le placche di Peyer e la lamina propria intestinale.
• Si lega sia all'integrina α4β7 che alla L-selectina, regolando così il passaggio e la ritenzione dei leucociti. L'isoforma 2, che manca del dominio simile alla mucina, potrebbe specializzarsi nel rafforzamento dell'adesione dipendente dall'integrina α4β7 indipendentemente dalla L-selectina.
• La proteina è una glicoproteina transmembrana di tipo I appartenente alla superfamiglia delle immunoglobuline, contenente domini simili alle immunoglobuline e una regione ricca di mucina (nell'isoforma canonica).
• La localizzazione subcellulare è prevalentemente alla membrana plasmatica, coerente con il suo ruolo nelle interazioni cellula-cellula.
• Specificità tissutale: Altamente espresso sulle venule endoteliali alte (HEV) e sulle venule della lamina propria nell'intestino tenue; espressione inferiore nel colon e nella milza. Molto basso nel pancreas e nel cervello; assente nel timo, prostata, ovaie, testicolo, cuore, placenta, polmone, fegato, muscolo scheletrico, rene e leucociti del sangue periferico.
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione N-legata e legami disolfuro, essenziali per l'integrità strutturale e il legame del ligando. Le parole chiave evidenziano anche lo splicing alternativo e la disponibilità della struttura 3D.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre gli aminoacidi 100‑200, una regione extracellulare; considerare che l'anticorpo può riconoscere sia il MADCAM1 nativo che quello denaturato, ma l'accessibilità dell'epitopo nei tessuti fissati deve essere convalidata.
• Per il Western blot, è prevista una banda intorno a 40 kDa in condizioni riducenti; utilizzare marcatori di peso molecolare appropriati e verificare con un controllo positivo (es. lisato di tessuto intestinale umano).
• In IHC‑P, il recupero dell'antigene (a base di calore o enzimi) potrebbe essere necessario per esporre l'epitopo; testare più metodi di recupero e diluizioni dell'anticorpo su tessuti noti positivi e negativi.
• Le condizioni ELISA come il tampone di rivestimento e il sistema di rilevamento dovrebbero essere ottimizzate individualmente; un saggio di competizione peptidica può aiutare a confermare la specificità.
• La reattività crociata è riportata per umano, topo e ratto; per altre specie, eseguire l'allineamento delle sequenze e test preliminari prima dell'applicazione.

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