Anticorpo monoclonale di coniglio MDA5 per WB, IP, ELISA - Q9BYX4

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di MDA5

• MDA5, codificato dal gene IFIH1, è un recettore dell'immunità innata che agisce come sensore citoplasmatico degli acidi nucleici virali, innescando risposte antivirali tra cui l'induzione di interferoni di tipo I e citochine pro-infiammatorie. Riferimenti correlati: PMID:28594402, PMID:32169843, PMID:33727702
• I suoi ligandi includono l'RNA a doppio filamento lungo (>1 kb) e l'mRNA privo di 2'-O-metilazione al cappuccio 5', permettendo di distinguere tra RNA proprio e non proprio. Riferimenti correlati: PMID:22160685
• Dopo il legame con l'RNA virale, MDA5 subisce cambiamenti conformazionali e si associa a MAVS/IPS1 sui mitocondri, portando alla fosforilazione di IRF3/IRF7 e alla trascrizione dei geni dell'interferone.
• MDA5 è coinvolto in modo critico nella rilevazione dei membri della famiglia Picornaviridae (ad esempio, il virus dell'encefalomiocardite) e dei coronavirus, incluso SARS-CoV-2. Riferimenti correlati: PMID:28606988, PMID:33440148, PMID:33514628
• La proteina contiene due domini CARD N-terminal, un dominio elicasi centrale DExD/H-box con attività ATPasica e un dominio regolatore C-terminale; si localizza prevalentemente nel citoplasma, ma anche nel nucleo e nei mitocondri.
• Modifiche post-traduzionali come fosforilazione e ISGilazione regolano la segnalazione di MDA5 per prevenire risposte aberranti all'interferone; le mutazioni sono associate alla sindrome di Aicardi-Goutières e al diabete di tipo 1.
• È ampiamente espresso a bassi livelli, con espressione relativamente più alta in placenta, pancreas e milza.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il Western blotting, ci si aspetta che l'anticorpo rilevi la proteina full-length IFIH1/MDA5 a ~117 kDa; può comparire anche una banda a 25 kDa dovuta a splicing alternativo o a clivaggio. Validare nel sistema di campioni pertinente.
• Negli saggi di immunoprecipitazione, tenere conto della localizzazione citoplasmatica e mitocondriale di MDA5 e della natura dinamica dei suoi complessi di attivazione.
• Per ELISA, questo anticorpo monoclonale ricombinante può fungere da reagente di cattura o di rilevazione; abbinarlo a un anticorpo di rilevazione selezionato accuratamente per garantire sensibilità e specificità.
• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (amminoacidi 1–205), che include i domini CARD in tandem; questa regione è altamente conservata ed essenziale per la segnalazione antivirale.

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