Anticorpo policlonale di coniglio anti-MDA5 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9BYX4

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di MDA5 (IFIH1)

• Codifica la proteina 1 contenente il dominio C dell'elicasi indotta dall'interferone (IFIH1), nota anche come proteina 5 associata alla differenziazione del melanoma (MDA5), recettore 2 simile a RIG-I (RLR-2), Helicard e autoantigene CADM-140. Appartiene alla famiglia dei recettori simili a RIG-I, recettori citoplasmatici di riconoscimento dei pattern.
• Funziona come un sensore chiave dell'immunità innata che rileva l'RNA virale nel citoplasma, attivando risposte antivirali tra cui la produzione di interferone di tipo I e di citochine pro-infiammatorie. Riferimenti correlati: PMID:28594402 PMID:32169843 PMID:33727702
• Riconosce specificamente l'mRNA privo di 2'-O-metilazione al cappuccio 5' e l'RNA a doppio filamento lungo (>1 kb) come segnali non-self di un'infezione virale. Riferimenti correlati: PMID:22160685
• In seguito al legame con il ligando, si localizza nei mitocondri e si associa a MAVS/IPS1, determinando l'attivazione delle chinasi TBK1 e IKBKE, la fosforilazione di IRF3 e IRF7 e l'induzione trascrizionale degli interferoni (IFN-α e IFN-β).
• Rileva un'ampia gamma di virus, inclusi i Picornaviridae (ad es. virus dell'encefalomiocardite, rinovirus), i coronavirus (incluso SARS-CoV-2), i flavivirus (dengue, virus del Nilo occidentale), il reovirus e il virus vaccinico. Riferimenti correlati: PMID:28606988 PMID:33440148 PMID:33514628
• Amplifica la segnalazione dell'immunità innata riconoscendo i metaboliti dell'RNA generati dall'endoribonucleasi antivirale RNasi L, potenziando la difesa dell'ospite.
• È ampiamente espresso a bassi livelli, con un'espressione relativamente più elevata nella placenta, nel pancreas e nella milza, e appena rilevabile nel cervello, nei testicoli e nei polmoni.
• È presente nel citoplasma e nel nucleo e si associa ai mitocondri dopo l'attivazione. Strutturalmente contiene due domini CARD N-terminali e un dominio elicasico C-terminale con attività di legame all'ATP e all'RNA. Le variazioni genetiche di IFIH1 sono associate a disturbi autoimmuni come la sindrome di Aicardi-Goutières e il diabete di tipo 1.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre i 205 amminoacidi N-terminali, che comprendono i due domini CARD. Questo design può riconoscere sia IFIH1 a lunghezza intera (predetto a circa 117 kDa) sia potenziali prodotti di clivaggio o isoforme (circa 25 kDa) osservati in determinati contesti.
• Nel western blot sono state riportate bande sia a 25 kDa sia a 117 kDa; convalidare il profilo di espressione nei lisati cellulari o tissutali di interesse e valutare l'impiego di controlli positivi (ad es. campioni infettati da virus o stimolati con interferone) per una rilevazione affidabile.
• Per l'immunoistochimica e l'immunofluorescenza, possono essere necessarie condizioni di recupero antigenico; si raccomandano esperimenti preliminari con tessuti positivi noti (ad es. placenta, pancreas).
• Essendo un anticorpo policlonale, può verificarsi variabilità tra lotti; titolare l'anticorpo per ogni nuova applicazione e includere controlli appropriati per garantire la specificità.

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