Anticorpo policlonale di coniglio anti-MMP13 per WB, IF/ICC, ELISA - P45452

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di MMP13

• MMP13, nota anche come collagenasi 3, è una metalloproteinasi della matrice secreta che svolge un ruolo centrale nella degradazione e nel rimodellamento della matrice extracellulare (ECM).
• Scinde i collageni a tripla elica, inclusi i tipi I, II e III, con la massima attività nei confronti del collagene solubile di tipo II, e degrada anche altri componenti della ECM, come fibronectina, tenascina-C (TNC) e aggrecano (ACAN).
• MMP13 contribuisce a processi fisiologici quali la guarigione delle ferite, il rimodellamento tissutale, la degradazione della cartilagine, lo sviluppo osseo, la mineralizzazione e l'ossificazione; è essenziale per il normale sviluppo osseo embrionale e la guarigione delle fratture tramite ossificazione endocondrale.
• La proteina è rilevata nella cartilagine fetale, nei condrociti ipertrofici, negli osteoblasti e nelle cellule periostali; l'espressione nei condrociti è indotta dalle citochine pro-infiammatorie TNF e IL1B, ed è presente anche nei linfociti T e nel tessuto del carcinoma mammario.
• La localizzazione subcellulare è principalmente nello spazio extracellulare e nella matrice extracellulare, dove la proteina viene secreta.
• Le principali caratteristiche e i domini post-traduzionali includono legame al calcio, ponti disolfuro, glicosilazione e fosforilazione; viene sintetizzata come zimogeno e richiede l'attivazione per esercitare l'attività proteasica.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno, corrispondente agli amminoacidi 262-471 della MMP13 umana, comprende probabilmente una regione del dominio catalitico; quando si utilizza questo anticorpo policlonale in WB, IF/ICC o ELISA, considerare la posizione dell'epitopo nell'interpretazione dei risultati.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di 54 kDa, ma le modifiche post-traduzionali, come la glicosilazione, e il processamento di attivazione possono causare spostamenti delle bande; validare il risultato utilizzando lisati di controllo positivi appropriati, ad esempio condrociti trattati con IL1B/TNF o linee di carcinoma mammario.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), MMP13 viene secreta; l'inclusione di fasi di permeabilizzazione può consentire di rilevare le pro-forme intracellulari, mentre la co-colorazione con marcatori della matrice extracellulare può migliorare la localizzazione.
• Sebbene sia indicata la reattività crociata per uomo, topo e ratto, gli anticorpi policlonali possono mostrare differenze specie-specifiche; verificare le prestazioni in ciascuna specie di interesse.

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