Anticorpo policlonale rabbit MonoMethyl-Histone H2B-K5 (P62807/Q16778) per WB, IF/ICC, ELISA

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'istone H2B

L'istone H2B è un componente fondamentale del nucleosoma, che avvolge e compatta il DNA nella cromatina. Questa compattazione limita l'accessibilità al DNA e svolge un ruolo centrale nella regolazione della trascrizione, nella riparazione del DNA, nella replicazione del DNA e nella stabilità cromosomica. H2B esiste in diverse isoforme codificate da geni distinti, con le accessioni UniProt P62807 (istone H2B tipo 1-C/E/F/G/I) e Q16778 (istone H2B tipo 2-E) che rappresentano le varianti principali.

Oltre al suo ruolo strutturale, H2B possiede un'ampia attività antibatterica e può contribuire alla barriera antimicrobica dell'epitelio colico e all'attività battericida del liquido amniotico.

H2B è ampiamente modificato post-traduzionalmente, contribuendo al "codice istonico" che regola la dinamica della cromatina. Le modifiche includono acetilazione, metilazione, fosforilazione, crotonilazione e ubiquitinazione su multipli residui di lisina, serina e arginina. La specifica monometilazione sulla lisina 5 (K5me1) è uno di questi marcatori che può influenzare l'espressione genica e lo stato della cromatina. L'anticorpo qui descritto è stato prodotto contro un peptide sintetico monometilato corrispondente a K5me1 di H2B umano, fornendo uno strumento per la ricerca epigenetica.

L'istone H2B si localizza nel nucleo e nei cromosomi, in coerenza con la sua funzione nucleosomica.

Riferimenti correlati: Le modifiche istoniche come l'acetilazione e la metilazione sono state ampiamente caratterizzate PMID:16627869. Studi aggiuntivi hanno identificato nuove acilazioni tra cui la crotonilazione PMID:21925322 e la lattilazione PMID:31645732 sulle lisine di H2B.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Per Western blotting (WB), utilizzare estratti nucleari per arricchire le proteine istoniche. Il segnale per monometil-H2B-K5 può essere basso; si consiglia di utilizzare saggi di competizione peptidica per confermare la specificità.
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC), garantire una corretta permeabilizzazione cellulare e considerare la preestrazione della cromatina per migliorare l'accessibilità dell'anticorpo ai target istonici.
• Per saggi basati su ELISA, rivestire le piastre con il peptide monometilato o estratti di istoni e convalidare con l'anticorpo.
• L'anticorpo presenta una prevista ampia reattività incrociata (uomo, topo, ratto e altre specie); ciononostante, verificare la reattività nel vostro specifico sistema di campioni con controlli appropriati.
• Come per ogni anticorpo specifico per modifiche post-traduzionali, può verificarsi variabilità tra lotti; includere controlli positivi e negativi noti in ogni esperimento.

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