MonoMethyl-Histone H3-K36 mAb di coniglio (Q16695/P68431) per WB, DB, IHC-P, ELISA

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'istone H3

L'istone H3 è un componente centrale del nucleosoma, che avvolge e compatta il DNA nella cromatina. Questa compattazione limita l'accessibilità del DNA ai macchinari cellulari che richiedono il DNA come modello. Di conseguenza, gli istoni svolgono un ruolo centrale nella regolazione della trascrizione, nella riparazione del DNA, nella replicazione del DNA e nella stabilità cromosomica. L'accessibilità del DNA è regolata da un complesso insieme di modifiche post-traduzionali degli istoni, note collettivamente come codice istonico, e attraverso il rimodellamento dei nucleosomi. Riferimenti correlati: UniProt Q16695, UniProt P68431

Vari geni codificano le varianti dell'istone H3. Le note e gli alias del prodotto includono H3C2, H3C3, H3C4, H3C6, H3C7, H3C8, H3C10, H3C11, H3C12 e HIST1H3A, che riflettono i diversi geni dell'istone H3.1 dipendenti dalla replicazione. Inoltre, la variante specifica del testicolo H3.1t (H3t, codificata da H3-4 / HIST3H3) è rappresentata dall'accessione SWISS Q16695. Queste varianti sono molto simili nella sequenza. Riferimenti correlati: UniProt Q16695, UniProt P68431

Subcellolarmente, l'istone H3 è localizzato nel nucleo ed è un componente principale dei cromosomi. La sua presenza è ubiquitaria nei nucleosomi in tutto il genoma. Riferimenti correlati: UniProt Q16695, UniProt P68431

Le modifiche post-traduzionali dell'istone H3, tra cui metilazione, acetilazione, fosforilazione e altre, regolano finemente la struttura e la funzione della cromatina. La monometilazione alla lisina 36 (K36) è una di queste modifiche. Questo anticorpo rileva specificamente la forma monometilata di K36 ed è stato generato utilizzando un immunogeno peptide sintetico monometilato che bersaglia questo residuo. Riferimenti correlati: UniProt Q16695, UniProt P68431

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Il peso proteico previsto dell'istone H3 è di circa 15 kDa. Tuttavia, a causa della sua natura fortemente basica, l'istone H3 migra spesso con un peso molecolare apparente leggermente superiore su SDS-PAGE. Verificare il modello di migrazione specifico nel vostro sistema di campioni.
• Questo anticorpo è stato ottenuto contro un peptide sintetico monometilato intorno a K36. Si prevede che riconosca specificamente la forma monometilata rispetto agli stati non modificati o ad altri stati di metilazione. Confermare la specificità utilizzando saggi di competizione peptidica o confrontando i segnali da lisati cellulari trattati con agenti modificanti della metilazione.
• Per Western blot (WB) e dot blot (DB), si consiglia di utilizzare protocolli di estrazione degli istoni che arricchiscono le proteine nucleari per migliorare la sensibilità di rilevamento.
• Nell'immunistochimica (IHC-P), le condizioni di recupero dell'antigene (ad es. tampone citrato pH 6,0 o tampone EDTA pH 9,0) potrebbero richiedere ottimizzazione. Includere tessuti di controllo positivo e negativo noti per valutare la specificità della colorazione.
• L'ELISA può essere utilizzato per screening ad alto rendimento o esperimenti di titolazione. Abbinare questo anticorpo con un anticorpo secondario anti-coniglio adatto coniugato a HRP o un altro enzima reporter per il rilevamento.

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