Anticorpo monoclonale di coniglio MonoMethyl-Histone H3-K36 (Q16695/P68431) per WB, DB, IP, ELISA, ChIP

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della MonoMethyl-Histone H3-K36

• L'istone H3 è un componente centrale del nucleosoma, che avvolge e compatta il DNA in cromatina. Questa struttura limita l'accessibilità del DNA e svolge un ruolo centrale nella regolazione della trascrizione, riparazione del DNA, replicazione del DNA e stabilità cromosomica. La regolazione dinamica della cromatina è mediata in parte da un complesso insieme di modifiche post-traduzionali degli istoni, collettivamente indicate come codice istonico.

• Negli esseri umani, più geni codificano le varianti canoniche dell'istone H3. H3.1 (rappresentata da SWISS P68431 e dai suoi numerosi prodotti genici come H3C1–H3C12) è la forma predominante dipendente dalla replicazione. Una variante H3 specifica del testicolo, H3.1t (SWISS Q16695; nota anche come H3/t o H3.4), è espressa esclusivamente nelle cellule testicolari e potrebbe contribuire alla riorganizzazione della cromatina durante la spermatogenesi.

• La coda N-terminale dell'istone H3 subisce ampie modifiche post-traduzionali, inclusa la metilazione di specifici residui di lisina. La monometilazione della lisina 36 (H3K36me1) è una di queste modifiche critiche, corrispondente alla metilazione della Lis-37 nella sequenza canonica UniProt. Questa modifica è stata identificata in numerosi studi proteomici. Riferimenti correlati: PMID:15983376, PMID:16185088, PMID:16267050, PMID:16627869, PMID:17194708

• H3K36me1 è stata implicata nell'elongazione trascrizionale, nello splicing dell'pre-mRNA e nella riparazione del DNA. La modifica è stabilita da metiltransferasi come NSD1, NSD2 e SETD2 (che possono anche catalizzare stati di metilazione superiori), ed è rimossa da demetilasi istoniche. La sua distribuzione genomica è tipicamente associata ai corpi genici attivi, sottolineando il suo ruolo nella regolazione genica.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno utilizzato per generare questo anticorpo è un peptide sintetico monometilato centrato su K36 dell'istone H3 umano. Quando si progettano e validano i flussi di lavoro sperimentali, considerare che il riconoscimento dell'anticorpo può dipendere dal specifico stato di metilazione (me1) e potrebbe essere influenzato da modifiche post-traduzionali adiacenti. Per le applicazioni ChIP, assicurarsi che il contesto cromatinico target e la specificità dell'anticorpo siano verificati utilizzando controlli positivi e negativi appropriati.

• Nel Western blot, la banda proteica attesa è di circa 15 kDa. Utilizzare gel ad alta percentuale (es. SDS-PAGE 12–15%) e condizioni di transfer ottimizzate (basso peso molecolare) per ottenere una risoluzione chiara. Si consiglia di includere un marcatore per istoni o un controllo H3 totale per un'identificazione accurata.

• Per ELISA e dot blot (DB), l'inclusione nella progettazione del saggio di peptidi sintetici rappresentanti H3K36 non metilato, monometilato, dimetilato e trimetilato può aiutare a confermare il riconoscimento specifico per la modifica.

• Il prodotto elenca un'ampia reattività incrociata prevista (Umano, Topo, Ratto e altri). Sebbene ciò suggerisca un'ampia compatibilità con le specie, si raccomanda vivamente la validazione con la vostra specifica specie e tipo di tessuto, specialmente per applicazioni non umane.

• Per tutte le applicazioni, le diluizioni operative ottimali e le condizioni dovrebbero essere determinate sperimentalmente utilizzando il sistema campione rilevante.

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