Anticorpo policlonale coniglio MonoMethyl-Histone H3-K36 (Q16695/P68431) - WB, ChIP, ELISA

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'istone H3

L'istone H3 è un componente principale del nucleosoma, avvolgendo e compattando il DNA per limitare l'accessibilità per la trascrizione, la replicazione e la riparazione. Il complesso insieme di modifiche post-traduzionali sugli istoni, comunemente indicato come codice degli istoni, regola la struttura e la funzione della cromatina.

L'istone H3 si localizza nel nucleo ed è un costituente primario dei cromosomi.

L'istone canonica H3.1 (codificata da più cluster genici umani, SWISS P68431) è espressa ampiamente, mentre la variante specifica dei testicoli H3.1t (H3-4, SWISS Q16695) si trova prevalentemente nelle cellule testicolari.

La lisina 37 dell'istone H3 (spesso indicata come K36 nella nomenclatura degli istoni maturi) è un sito ben caratterizzato per la metilazione. La mono-, di- e tri-metilazione di questo residuo sono catalizzate da metiltransferasi come SETD2 e membri della famiglia NSD, svolgendo ruoli critici nella regolazione trascrizionale, nella riparazione del DNA e nello splicing alternativo. Riferimenti correlati: PMID:15983376, PMID:16185088, PMID:16267050

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico derivato dalla coda N‑terminale (aa 1–100) dell'istone H3 umana, che comprende il residuo K36. Questa progettazione può fornire una buona specificità per la forma mono‑metilata quando validata tramite saggi di blocco con peptidi.
• Per il Western blotting, utilizzare estratti nucleari o arricchiti di istoni provenienti da cellule. È prevista una banda vicino a 15 kDa; confermare la specificità utilizzando la competizione peptidica o confrontando i segnali in lisati cellulari con metilazione modulata.
• Negli esperimenti ChIP e ChIP‑seq, la specificità dell'anticorpo in condizioni di crosslinking dovrebbe essere verificata con loci positivi e negativi noti per contenere marcature H3K36me1. Considerare i controlli spike‑in per la normalizzazione.
• La reattività crociata con topo, ratto e altre specie è prevista sulla base dell'omologia di sequenza; validare nel sistema di campione pertinente se si utilizzano specie non umane.

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