Anticorpo monoclonale di coniglio MonoMethyl-Histone H3-K79 (Q16695/P68431) – WB, ChIP, IHC-P, ELISA

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'istone H3

• L'istone H3 è un componente centrale dei nucleosomi, essenziale per l'impacchettamento del DNA in cromatina. Svolge un ruolo fondamentale nella regolazione della trascrizione, nella riparazione del DNA, nella replicazione del DNA e nel mantenimento della stabilità cromosomica. Le modifiche post-traduzionali (PTM) sull'istone H3, come metilazione, acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione, formano un "codice istonico" dinamico che modula l'accessibilità della cromatina e l'espressione genica.
  Riferimenti correlati: UniProt Q16695, UniProt P68431

• A livello subcellulare, l'istone H3 si localizza nel nucleo e nei cromosomi. Tra le varianti di H3, H3.1t (Q16695) è espressa principalmente nelle cellule testicolari, mentre H3.1 (P68431) è codificata da un cluster di geni dipendenti dalla replicazione e rappresenta la forma somatica canonica di H3.
  Riferimenti correlati: UniProt Q16695 (specificità tissutale), UniProt P68431 (localizzazione subcellulare)

• La lisina 79 (K79) dell'istone H3 è un residuo ben caratterizzato che subisce mono-, di- e trimetilazione. Questi stati di metilazione esercitano influenze regolatorie distinte sulla struttura e funzione della cromatina, con K79me1 implicata in processi come l'elongazione della trascrizione e il silenziamento telomerico.
  Riferimenti correlati: UniProt Q16695, UniProt P68431 (modifiche annotate a K79)

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Progettazione dell'Immunogeno: L'immunogeno è un peptide sintetico monometilato che circonda K79 dell'istone H3 umano. Per applicazioni che richiedono elevata specificità per K79me1, considerare l'uso di istone H3 non modificato o peptidi di-/trimetilati K79 come controlli negativi per confermare la selettività dell'anticorpo.
• Western Blotting (WB): È prevista una banda a circa 15 kDa in lisati cellulari totali di campioni umani, di topo o di ratto. Ottimizzare la diluizione dell'anticorpo e le condizioni di incubazione per il tipo specifico di campione.
• Immunoprecipitazione della Cromatina (ChIP/ChIP‑seq): Questo anticorpo è adatto per ChIP nativo o cross-linkato. Convalidare l'efficienza di arricchimento mediante qPCR o sequenziamento con loci genomici positivi e negativi appropriati.
• ELISA e DB: È possibile utilizzare saggi di legame diretto; assicurarsi che il peptide di rivestimento mantenga lo stato di metilazione corretto.
• Cross‑Reattività: L'ampia cross-reattività prevista suggerisce la conservazione dell'epitopo K79me1 tra le specie. Verificare le prestazioni in specie meno comuni con esperimenti pilota.
• Conservare e maneggiare come raccomandato; spedito in sacche di ghiaccio.

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