Anticorpo policlonale rabbit MonoMethyl-Istono H3-K79 (Q16695 / P68431) per WB, ELISA, ChIP

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del MonoMethyl-Istono H3

• L'istone H3 è un componente centrale del nucleosoma, che avvolge e compatta il DNA nella cromatina. Questa compattazione limita l'accessibilità al DNA, regolando quindi processi nucleari fondamentali come la trascrizione, la riparazione del DNA, la replicazione e la stabilità cromosomica.
• Come attore chiave nel "codice istonico", H3 subisce numerose modifiche post-traduzionali site-specifiche (PTM) — come metilazione, acetilazione, fosforilazione e citrullinazione — che regolano finemente la struttura della cromatina e l'espressione genica. La monometilazione alla lisina 79 (K79me1) rappresenta uno di questi marcatori regolatori, implicato nel controllo trascrizionale e nella memoria epigenetica.
• L'istone H3 localizza principalmente nel nucleo ed è parte integrante dei cromosomi. Nell'uomo esistono diverse varianti di H3: la variante canonica H3.1 dipendente dalla replicazione (codificata da diversi geni HIST1H3 e P68431) e la variante H3.1t specifica del testicolo (Q16695), espressa selettivamente nelle cellule testicolari.
• La funzione precisa della monometilazione K79 dipende dal contesto; è stata associata sia ad ambienti cromatici attivi che repressi, e la sua regolazione aberrante è legata a disordini dello sviluppo e tumori.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Progettazione dell'immunogeno: L'anticorpo è stato prodotto contro un peptide sintetico monometilato corrispondente ai residui attorno alla posizione K79 dell'istone H3 umano (NP_003520.1), garantendo la specificità per il marcatore K79me1.
• Western blotting (WB): Per la rivelazione, si consiglia di utilizzare estratti di proteine nucleari o istoni estratti con acido. Dato il peso molecolare previsto di circa 15 kDa, i protocolli standard di SDS-PAGE e trasferimento sono adatti. Testare diverse diluizioni dell'anticorpo per ottimizzare il rapporto segnale/rumore.
• ELISA: Utilizzare peptide sintetici monometilati e appropriati tamponi di bloccaggio per minimizzare il legame non specifico. Includere peptidi non modificati e altri peptidi modificati come controlli per confermare la specificità.
• Chromatin immunoprecipitation (ChIP): Le condizioni di cross-linking e la sonicazione devono essere ottimizzate con cura per preservare il marcatore metilato e ottenere una frammentazione della cromatina adeguata. Validare le prestazioni dell'anticorpo nella specie di interesse (umano, mouse, ratto) e nel contesto cellulare specifico.
• Reattività crociata: Si prevede che l'anticorpo reagisca con un'ampia gamma di specie grazie all'elevata conservazione della sequenza della regione H3K79. Validare la specificità nel vostro sistema sperimentale utilizzando controlli positivi e negativi appropriati.

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