Anticorpo Policlonale di Coniglio MonoMethyl-Histone H3-K79 (Q16695/P68431) per WB, IHC, ChIP

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Istone H3

L'istone H3 è un componente fondamentale del nucleosoma, l'unità ripetitiva di base della cromatina. Insieme a H2A, H2B e H4, impacchetta il DNA genomico in strutture compatte, regolando così l'accesso per processi basati sul DNA come trascrizione, replicazione, riparo e stabilità cromosomica. La modulazione dinamica dell'architettura della cromatina è ottenuta attraverso un complesso insieme di modificazioni post-traduzionali sulle code e sui domini globulari degli istoni, collettivamente indicate come "codice degli istoni". Riferimenti correlati: UniProt Q16695, UniProt P68431

L'istone H3 si localizza principalmente nel nucleo ed è associato ai cromosomi durante tutto il ciclo cellulare. Riferimenti correlati: UniProt Q16695, UniProt P68431

Mentre le varianti canoniche dell'istone H3 sono espresse in modo ubiquitario, alcuni isoformi dell'istone H3 mostrano pattern specifici per tessuto. Ad esempio, l'istone H3.1t (H3t), codificato da H3-4 (HIST3H3), è espresso prevalentemente nelle cellule testicolari. Riferimenti correlati: UniProt Q16695

L'istone H3 subisce estese modificazioni post-traduzionali, tra cui metilazione, acetilazione, fosforilazione, citrullinazione e altre, in vari residui. Tra queste, la metilazione in lisina 79 (K79) è un marcatore epigenetico conservato, con stati di mono-, di- e tri-metilazione ciascuno associato a funzioni cromatiniche distinte. Questo anticorpo policlonale è stato sviluppato utilizzando un peptide sintetico monometilato intorno a K79 per rilevare specificamente la modificazione K79me1.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è stato progettato come un peptide sintetico corrispondente alla regione circostante la lisina 79 dell'istone H3 umano, recante un gruppo monometilico in K79. Ciò garantisce una reattività specifica verso la forma monometilata; la reattività crociata con forme non metilate o con stati di metilazione superiori dovrebbe essere valutata nel contesto sperimentale.
• Per il Western blotting (WB), considerare l'uso di istoni estratti con acido o frazioni nucleari arricchite in cromatina per migliorare il rilevamento, con una migrazione proteica tipica osservata a ~15 kDa.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P) e nell'immunofluorescenza (IF/ICC), validare l'anticorpo in condizioni appropriate di fissazione e recupero dell'antigene per il tessuto o il tipo cellulare di interesse.
• Per l'immunoprecipitazione della cromatina (ChIP) e il ChIP-sequenziamento (ChIP-seq), ottimizzare la frammentazione e la quantità di anticorpo per l'input di cromatina specifico; si raccomanda l'inclusione di loci genomici positivi e negativi per H3K79me1.
• Nei saggi basati su ELISA, l'anticorpo può essere impiegato per confermare la specificità del peptide; validare le prestazioni con un pannello di peptidi metilati e non metilati.

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