pAb Rabbit contro MonoMetil-Istone H3-K9 (Q16695/P68431) per WB, ChIP-seq, ELISA

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'istone H3

• L'istone H3 è un componente fondamentale del nucleosoma, che avvolge e compatta il DNA nella cromatina. Questo ruolo strutturale è fondamentale per la regolazione della trascrizione, la riparazione del DNA, la replicazione del DNA e la stabilità cromosomica. Riferimenti correlati: UniProt Q16695, UniProt P68431
• Le varianti H3.1 e H3.1t (codificate rispettivamente da geni come H3C1, H3C2, ecc. e H3-4) condividono un'elevata similarità di sequenza e si localizzano nel nucleo e nei cromosomi. Riferimenti correlati: UniProt Q16695, UniProt P68431
• H3.1t (Q16695) è espresso specificamente nelle cellule testicolari, suggerendo un ruolo specializzato nell'organizzazione della cromatina durante la spermatogenesi. Riferimenti correlati: UniProt Q16695
• Gli istoni subiscono un'ampia gamma di modifiche post-traduzionali, tra cui metilazione, acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione. La lisina 9 dell'istone H3 (H3K9) è un residuo critico per la metilazione, con stati di mono-, di- e trimetilazione che hanno ciascuno esiti biologici distinti. Questo anticorpo è stato ottenuto contro un peptide sintetico monometilato intorno alla K9, consentendo la rilevazione specifica di H3K9me1. Riferimenti correlati: UniProt Q16695, UniProt P68431
• La regolazione dinamica della metilazione di H3K9 è coinvolta nella formazione dell'eterocromatina, nella repressione trascrizionale e nell'ereditarietà epigenetica. La monometilazione (H3K9me1) è spesso associata a regioni eucromatiche e all'attivazione genica, anche se il suo ruolo funzionale può variare in base al contesto genomico. Riferimenti correlati: UniProt Q16695, UniProt P68431

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Per il Western blotting (WB), consigliamo di utilizzare lisati arricchiti in frazione nucleare per migliorare la rilevazione dell'istone H3. Il peso molecolare previsto è ~15 kDa; regolare di conseguenza la percentuale di acrilammide nel gel e le condizioni di trasferimento. Includere sempre marcatori di peso molecolare appropriati.
• Quando si utilizza questo anticorpo per applicazioni basate sull'immunoprecipitazione come ChIP e ChIP-seq, verificare la specificità includendo controlli negativi (ad es. peptide non metilato, o cellule/tessuto privi della modifica) e controlli positivi (ad es. cellule note per contenere H3K9me1). L'ottimizzazione della reticolazione e l'efficienza della frammentazione sono fattori critici.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P) o l'immunofluorescenza (IF/ICC), considerare metodi di recupero dell'antigene e fasi di permeabilizzazione per esporre gli epitopi nucleari. Convalidare la colorazione in tessuti noti come positivi e negativi.
• Data l'ampia reattività crociata prevista, ci si aspetta che l'anticorpo riconosca H3K9me1 in uomo, topo, ratto e altre specie. Consigliamo comunque di confermare la reattività nel vostro specifico sistema di campioni.

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