Anticorpo Monoclonale Coniglio MonoMetil-Istona H3-R2 (Q16695/P68431) – Validato per WB, DB, ELISA, CUT&Tag

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Istona H3.1/H3.1t

L'istona H3.1 (e la variante specifica dei testicoli H3.1t) sono componenti fondamentali del nucleosoma, l'unità ripetitiva fondamentale della cromatina. Come istoni, avvolgono e compattano il DNA, limitando così la sua accessibilità alla macchinaria cellulare. Gli istoni svolgono un ruolo centrale nella regolazione della trascrizione, nella riparazione del DNA, nella replicazione del DNA e nella stabilità cromosomica.

La regolazione dinamica dell'accessibilità del DNA viene raggiunta attraverso un complesso insieme di modificazioni post-traduzionali (PTM) sulle code degli istoni, collettivamente note come codice degli istoni. Queste modifiche includono acetilazione, metilazione, fosforilazione e molte altre, e sono riconosciute da specifiche proteine "reader" che le traducono in risultati biologici.

L'istona H3.1 è localizzata esclusivamente nel nucleo ed è associata ai cromosomi. La sua espressione è dipendente dalla replicazione ed è altamente arricchita nelle cellule somatiche, mentre la variante H3.1t (Q16695) è espressa specificamente nelle cellule testicolari.

La metilazione dell'arginina 2 (R2) dell'istona H3 è una modifica chiave catalizzata dalle protein arginine methyltransferases (PRMTs) come PRMT6. Questa modifica può esistere in stati mono- o dimetilati ed è coinvolta nella regolazione della struttura della cromatina e dell'espressione genica. La forma monometilata (H3R2me1) è un intermedio critico che può influenzare il legame delle proteine effettrici ed è spesso arricchita ai promotori dei geni attivi.

Riferimenti correlati: PMID:17898714 (metilazione di H3R2 mediata da PRMT6) PMID:18077460 (metilazione di H3R2 e regolazione trascrizionale)

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno era un peptide monometilato sintetico attorno a R2 dell'istona H3 umana. Per le applicazioni Western blot e dot blot, considerare l'inclusione di un controllo di competizione con peptide non metilato per confermare il legame specifico per la metilazione.
• Per gli saggi CUT&Tag, la specificità dell'anticorpo per la R2 monometilata può permettere una mappatura precisa della ricchezza di H3R2me1. Validare sempre nel sistema di campione pertinente con appropriati controlli positivi e negativi.
• Le condizioni di diluizione e incubazione dovrebbero essere ottimizzate empiricamente. L'anticorpo può cross-reagire con stati di metilazione simili su altre varianti dell'istona H3; verificare con estratti proteici noti se necessario.

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