pAb di coniglio MonoMethyl-Histone H3-R26 – Q16695/P68431 per WB, IF/ICC, ELISA

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'istone H3

• L'istone H3 è un componente fondamentale del nucleosoma e svolge un ruolo centrale nell'impacchettamento del DNA e nell'organizzazione della cromatina. È fondamentale per processi come la trascrizione, la replicazione e la riparazione del DNA. Riferimenti correlati: UniProt Q16695, UniProt P68431
• L'istone H3 si localizza prevalentemente nel nucleo ed è associato ai cromosomi. Riferimenti correlati: UniProt Q16695, UniProt P68431
• Le modifiche post-traduzionali sull'istone H3, chiamate collettivamente codice dell'istone, regolano l'attività genica e gli stati della cromatina. Tra le modifiche più importanti vi è la metilazione su vari residui di arginina e lisina. Ad esempio, i residui di arginina possono essere monometilati, dimetilati simmetricamente o asimmetricamente dalle proteine arginina metiltransferasi, influenzando i risultati trascrizionali (es. metilazione R3 da PRMT6, PMID: 17898714, PMID: 18077460; metilazione R17 da CARM1, PMID: 15345777). La monometilazione all'R26 è una modifica specifica di interesse. Riferimenti correlati: PMID:17898714, PMID:18077460, PMID:15345777
• Le varianti dell'istone H3 mostrano un'espressione tessuto-specifica: H3.1t (Q16695) è espresso principalmente nelle cellule testicolari, mentre l'H3.1 canonico (P68431) è ubiquitario. Riferimenti correlati: UniProt Q16695 (dichiarazione sulla specificità tissutale).

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico monometilato intorno all'arginina 26 dell'istone H3 umano. Quando si utilizza questo anticorpo, tenere conto che può riconoscere preferenzialmente la forma monometilata; la reattività crociata con stati non metilati o altri stati di metilazione (es. dimetilati) deve essere convalidata nel proprio sistema sperimentale specifico.
• Per Western blot (WB), si consigliano lisati arricchiti di nucleo per migliorare la rilevazione dell'istone H3. Ottimizzare le condizioni di caricamento e trasferimento appropriate per proteine di basso peso molecolare (~15 kDa).
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), i metodi di permeabilizzazione e la fissazione possono influenzare l'accessibilità dell'epitopo; convalidare il pattern di colorazione con controlli positivi e negativi appropriati.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato per rilevare peptidi H3 monometilati; si consiglia di utilizzare saggi competitivi per confermare la specificità.
• Poiché la reattività è prevista per un'ampia gamma di specie oltre a umano, topo e ratto, si consiglia la convalida in altre specie.

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