Anticorpo policlonale coniglio MonoMetil-Istone H3-R8 (Q16695/P68431) per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di Istona H3.1t/H3.1

L'istone H3 è un componente fondamentale del nucleosoma, avvolge il DNA nella cromatina e limita l'accessibilità per trascrizione, replicazione e riparazione. Le modifiche post-traduzionali (PTM) delle code degli istoni costituiscono un "codice istonico" che regola questi processi.
Riferimenti correlati: UniProt: Q16695, P68431.

Il genoma umano codifica diverse varianti di H3: H3.1 è ubiquitario e codificato da diversi geni (H3C1–H3C12), mentre H3.1t (H3-4/HIST3H3) è specifico del testicolo.
Riferimenti correlati: UniProt: Q16695.

L'arginina 8 (R8) nella code N-terminale può subire monometilazione (obiettivo di questo anticorpo), dimetilazione simmetrica (da PRMT5) o citrullinazione. Questi marcatori influenzano gli stati della cromatina e l'espressione genica.
Riferimenti correlati: PMID:15345777, PMID:16567635.

L'istone H3 si localizza nel nucleo e nei cromosomi, con un peso molecolare previsto di circa 15 kDa.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico monometilato nella regione dell'arginina 8; l'anticorpo dovrebbe rilevare principalmente H3R8 monometilato. Verificare la specificità con lisati/peptidi di controllo per escludere reattività incrociata con dimetilazione simmetrica o citrullinazione nello stesso sito.
• Per il Western blotting, l'arricchimento di istoni (estrazione acida) migliora spesso il segnale; la banda attesa è ~15 kDa.
• In IHC-P, si consigliano il recupero dell'antigene indotto dal calore e il tessuto testicolare (ricco di H3.1t) come controllo positivo.
• Per IF/ICC, ottimizzare fissazione e permeabilizzazione poiché il bersaglio è nucleare.
• Nei saggi ELISA può essere utile includere uno standard di peptide monometilato per la calibrazione.
• Si prevede una reattività in soggetti umani, topi, ratti e altre specie grazie alla conservazione della sequenza; si consiglia comunque la convalida nel sistema di campioni specifico.
• Essendo un anticorpo policlonale, la coerenza tra lotti può variare; titolare sempre nuovamente e convalidare nuovi lotti.

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