Anticorpo policlonale di coniglio MonoMetil-Istone H4-K20 (P62805) per ricerca epigenetica, WB/ELISA

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'istone H4

L'istone H4 è un componente centrale del nucleosoma, che avvolge e compatta il DNA nella cromatina. Questo processo limita l'accessibilità del DNA e svolge un ruolo centrale nella regolazione della trascrizione, nella riparazione del DNA, nella replicazione del DNA e nella stabilità cromosomica. L'accessibilità del DNA è regolata da un complesso insieme di modificazioni post-traduzionali, denominato collettivamente codice istonico, e dal rimodellamento dei nucleosomi. Riferimenti correlati: UniProt P62805

L'istone H4 si localizza nel nucleo ed è un componente strutturale dei cromosomi. L'H4 acetilato è rilevabile nel nucleo degli spermatidi allo stadio 11. Riferimenti correlati: UniProt P62805

La lisina 20 dell'istone H4 (corrispondente alla posizione 21 nella proteina full-length) è soggetta a mono-, di- e tri-metilazione. La monometilazione H4K20 è coinvolta nella compattazione della cromatina, nella formazione dell'eterocromatina e nella risposta al danno del DNA. Queste modifiche aggiungono diversità funzionale al codice istonico. Riferimenti correlati: PMID:12086618, PMID:15964846, PMID:17967882

L'istone H4 è altamente conservato tra le specie, con un'ampia gamma di altre modificazioni post-traduzionali tra cui acetilazione, citrullinazione, fosforilazione e ubiquitinazione su multipli residui. Questa conservazione rende H4 un target prezioso per lo studio della regolazione epigenetica in diversi organismi modello. Riferimenti correlati: UniProt P62805

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico monometilato corrispondente alla regione K20; si consiglia di verificare la specificità dell'anticorpo tramite ELISA di competizione peptidica utilizzando peptidi K20 non modificati, mono-, di- e tri-metilati.
• Per Western blot, si consiglia l'estrazione acida degli istoni o la frazionamento nucleare per arricchire l'istone H4. Il peso molecolare previsto è di circa 11 kDa; utilizzare un gel SDS-PAGE al 15% o un gel a gradiente per una separazione ottimale degli istoni di basso peso molecolare.
• Dato l'ampia cross-reattività prevista (uomo, topo, ratto e altre specie), validare l'anticorpo nel sistema di campioni pertinente, poiché l'intensità del segnale può variare in base ai livelli di metilazione endogena.
• Un test ELISA può essere utilizzato per quantificare i livelli relativi di mono-metil H4K20 utilizzando preparazioni istoniche standardizzate.

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