MonoMethyl-UHRF1-K385 Anticorpo Policlonale di Coniglio pAb (Q96T88) - Anticorpo per Epigenetica per WB, DB, ELISA

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di UHRF1

• UHRF1 (E3 ubiquitina-proteina ligasi UHRF1) è un regolatore epigenetico chiave che collega la metilazione del DNA e la modificazione della cromatina. Svolge un ruolo critico nell'ereditarietà dei pattern di metilazione del DNA reclutando DNMT1 al DNA emimetilato durante la replicazione, garantendo così la fedele propagazione dei segni di metilazione. Riferimenti correlati: PMID:10646863, PMID:15009091, PMID:19056828, PMID:23022729, PMID:24013172, PMID:27595565, PMID:30104358, PMID:30392929, PMID:30392931, PMID:39607687.
• Agendo sia come lettore che scrittore di istoni, UHRF1 riconosce specificamente H3K9me3 e H3R2me0, il che attiva la sua attività di E3 ubiquitina ligasi. Successivamente monoubiquitina l'istone H3 in Lis-18 (H3K18ub), creando un sito di aggancio per DNMT1. Ubiquitina anche H3K14 e H3K23 in misura minore. Riferimenti correlati: PMID:15361834, PMID:17673620, PMID:17967883, PMID:18772889, PMID:21745816, PMID:21777816, PMID:22100450, PMID:22837395, PMID:23022729, PMID:27595565, PMID:30104358, PMID:24013172.
• Oltre al suo ruolo nella metilazione del DNA, UHRF1 partecipa alla riparazione del DNA cooperando con UHRF2 per garantire il reclutamento di FANCD2 ai cross-link intercatena. Ubiquitina anche proteine non istoniche come KIF11 e PML, influenzando l'architettura del fuso e altri processi. Riferimenti correlati: PMID:30335751, PMID:22945642, PMID:37728657.
• UHRF1 si localizza prevalentemente nel nucleo e si associa ai cromosomi durante la fase S, in particolare all'eterocromatina pericentrica in replicazione. Nelle cellule in fase non-S, si distribuisce omogeneamente nel nucleo. Riferimenti correlati: PMID:10646863, PMID:17673620, PMID:17967883, PMID:21777816.
• L'espressione tissutale è osservata in timo, midollo osseo, testicolo, polmone e cuore, con sovraespressione riportata nel cancro al seno. Riferimenti correlati: PMID:10646863, PMID:12838312, PMID:15361834.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per la rilevazione in Western blot, considerare di arricchire estratti nucleari o frazioni di cromatina per migliorare il segnale per UHRF1 e le sue varianti metilate.
• Poiché l'anticorpo riconosce specificamente la K385 monometilata, utilizzare controlli con peptide non modificato e differenzialmente metilato in saggi di dot blot (DB) o ELISA per confermare la specificità.
• L'espressione e la modificazione di UHRF1 dipendono dal ciclo cellulare; sincronizzare le cellule in fase S può migliorare il rilevamento del bersaglio.
• È riportato che l'anticorpo reagisce in modo incrociato con UHRF1 di topo e ratto; tuttavia, convalidare nella specie e nel tipo di campione rilevanti per garantire le prestazioni attese.
• Ottimizzare le condizioni di blocco e lavaggio, poiché gli anticorpi specifici per la metilazione possono richiedere un'attenta regolazione per minimizzare il legame aspecifico.

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