Anticorpo Monoclonale Mouse anti-Umano CD3 per Citometria a Flusso - P07766

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Catena Epsilon di CD3

• CD3E codifica per la catena epsilon del complesso recettore delle cellule T (TCR)-CD3, un recettore multimerico essenziale per l'attivazione dei linfociti T e l'immunità adattativa. Riferimenti correlati: PMID:15294938 PMID:15546002 PMID:2470098
• In seguito al legame del TCR, i motivi di attivazione basati sulla tirosina (ITAM) all'interno delle code citoplasmatiche delle catene CD3 vengono fosforilati dalle chinasi Src, consentendo la segnalazione a valle. Riferimenti correlati: PMID:2470098 PMID:40592325
• Gli ITAM di CD3E fosforilati fungono da siti di ancoraggio per la chinasi ZAP70, che viene poi fosforilata e convertita in un enzima attivo, propagando i segnali di attivazione delle cellule T.
• CD3E è fondamentale per il corretto sviluppo delle cellule T, funzionando sia nei complessi pre-TCR che nei complessi TCR maturi durante la selezione dei timociti.
• La regione citoplasmatica di CD3E contiene motivi di endocitosi che mediano l'internalizzazione e la down-regolazione superficiale dei complessi TCR-CD3, modulando la responsività delle cellule T. Riferimenti correlati: PMID:10384095 PMID:26507128
• CD3E funge anche da recettore per ITPRIPL1, che inibisce l'attivazione delle cellule T promuovendo l'interazione con NCK1 e bloccando la cascata di segnalazione ERK-NFkB. Riferimenti correlati: PMID:12110186 PMID:38614099
• La proteina si localizza alla membrana cellulare come proteina di membrana di tipo I a passaggio singolo, caratterizzata da un dominio extracellulare simile alle immunoglobuline e da una regione citoplasmatica contenente ITAM.
• CD3E subisce modifiche post-traduzionali chiave, principalmente la fosforilazione della tirosina, che è centrale per la sua funzione di segnalazione. Riferimenti correlati: PMID:2470098 PMID:40592325

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno utilizzato è la proteina CD3 umana ricombinante; assicurarsi che la preparazione del campione preservi la conformazione nativa di CD3 per un legame ottimale dell'anticorpo.
• Per la citometria a flusso, eseguire una titolazione dell'anticorpo utilizzando la specifica popolazione cellulare in uso per determinare la concentrazione di colorazione ottimale e minimizzare il fondo.
• Convalidare la reattività incrociata dell'anticorpo nel proprio sistema sperimentale, poiché questo clone è specifico per CD3 umano e potrebbe non riconoscere CD3 di altre specie.
• presenta eccitazione a ~633 nm; progettare il pannello multicolore con fluorofori compatibili per evitare sovrapposizioni spettrali.
• CD3 è espresso sui linfociti T maturi; utilizzare strategie di gating appropriate e coloranti di vitalità per identificare accuratamente i sottogruppi di cellule T vive.

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